脂多糖诱导的小鼠急性肺损伤中m6A修饰的综合分析

背景：N6-甲基腺苷（m6A）甲基化是mRNA中最常见的转录后修饰，在各种疾病中发挥重要作用。然而，m6A修饰在ALI形成中的确切功能仍不清楚。在本研究中，我们探讨了m6A甲基化的转录组分布及其在ALI中的可能作用。方法：利用脂多糖（LPS）建立ALI小鼠模型。采用实时qPCR、Western blotting和m6A斑点印迹评估m6A甲基化水平和m6A甲基化酶的表达。利用MeRIP-Seq和RNA-seq探讨ALI小鼠中差异m6A修饰和差异表达基因。通过实时qPCR和Western blotting评估枢纽基因和富集通路。结果：我们的研究结果表明，ALI小鼠肺组织中总体m6A甲基化水平升高，同时METTL3和FTO水平降低。值得注意的是，这些甲基化酶的蛋白表达在不同细胞中有所不同。与对照组相比，ALI中有772个差异表达的m6A峰，其中316个高甲基化和456个低甲基化。GO和KEGG分析表明这些差异甲基化基因与钙信号通路和cAMP信号通路相关。此外，通过MeRIP-Seq和RNA-Seq的联合分析，我们鉴定了50个具有显著m6A峰和mRNA表达的基因。KEGG分析还表明，这些重叠基因与钙信号通路、cGMP-PKG信号通路等密切相关。此外，Western blotting结果显示，ALI后纤连蛋白富亮氨酸跨膜蛋白3（Flrt3）以及钙信号通路和cGMP-PKG信号通路的蛋白表达显著增加。结论：m6A修饰在ALI的发病机制中至关重要，并为进一步研究ALI的预防和治疗提供了基础。