磷酸化CPI-17和MLC2作为冠状动脉痉挛致心源性猝死的生物标志物

冠状动脉痉挛（CAS）在各种缺血性心脏病的发病机制中起重要作用，并逐渐成为危及生命的心律失常的常见原因。CAS的具体分子机制尚未完全阐明，也没有针对该疾病的具体诊断标志物。因此，本研究旨在探讨CAS的具体分子机制，并筛选潜在的诊断标志物。为此，我们成功构建了大鼠CAS模型，并实现了人冠状动脉平滑肌细胞（hCASMC）收缩模型的体外培养。在体内和体外研究了蛋白激酶C（PKC）通过C激酶增强的蛋白磷酸酶1抑制剂17 kDa（CPI-17）/肌球蛋白II调节轻链（MLC2）通路调节CAS的可能分子机制，以筛选CAS的潜在分子标志物。我们进行了苏木精和伊红染色、心肌酶谱和透射电子显微镜，以确定CAS大鼠的心肌和冠状动脉损伤。然后，通过免疫组织化学染色、免疫荧光染色和Western blotting，我们进一步证明了PKC通过CPI-17/MLC2通路调节CAS的潜在分子机制。结果显示，CAS大鼠冠状动脉中发生PKCα膜转位。CPI-17/MLC2信号在经历CAS的冠状动脉中被显著激活。此外，用血管紧张素II（Ang II）体外处理hCASMCs增加了PKCα膜转位，同时持续激活CPI-17/MLC2信号。相反，PKC的特异性抑制剂GF-109203X和calphostin C使CPI-17/MLC2信号失活。我们还收集了疑似死于CAS的死者冠状动脉组织，并测量了其磷酸化CPI-17（p-CPI-17）和MLC2（p-MLC2）的水平。在这些受试者的组织中，p-CPI-17和p-MLC2的免疫组织化学染色呈阳性。这些发现表明，PKCα通过CPI-17/MLC2通路诱导CAS；因此，p-CPI-17和p-MLC2可作为CAS的潜在标志物。我们的数据提供了新的证据，表明针对PKC或CPI-17/MLC2信号的治疗策略可能有望治疗CAS。