人参浆果提取物通过调节高脂饮食大鼠的血液凝固参与血流调节

The involvement of ginseng berry extract in blood flow via regulation of blood coagulation in rats fed a high-fat diet.

作者信息Min Hee Kim, Jongsung Lee, Sehyun Jung, Joo Wan Kim, Jae-Ho Shin, Hae-Jeung Lee
PMID28413315
发布时间2017-04
DOI10.1016/j.jgr.2016.01.004

实验完整度

包含体外生化检测、凝血功能测定、血小板功能分析及组织学分析等多个独立证据层级,并进行了动物模型验证。

主要模型

雄性Sprague Dawley大鼠 高脂饮食诱导的高脂血症/动脉粥样硬化模型

重点核对

大鼠品系:Sprague Dawley,5周龄,雄性 饮食造模:高脂饮食(D12451,45% kcal from fat)持续11周 GBx给药剂量:50、100、150 mg/kg体重,灌胃,持续6周 样本量:每组12只大鼠 检测指标:血清脂质代谢物(瘦素、脂联素、apoE、apoB/A)、凝血参数(PT、aPTT)、血小板功能(Col/EPI、Col/ADP)、主动脉组织形态学

摘要

背景:本研究调查了人参浆果热水提取物(GBx)对喂食高脂饮食(HFD)的大鼠通过调节脂质代谢物和血液凝固来影响血流的作用。方法:将60只大鼠按体重降序分为五组。除对照组外,其余四组喂食含45%千卡脂肪的HFD,持续11周,不添加GBx。随后,GBx组通过胃管灌胃给予溶解在蒸馏水中的GBx,剂量分别为50(GBx 50)mg/kg、100(GBx 100)mg/kg或150(GBx 150)mg/kg体重,持续6周,同时继续喂食HFD。为了研究GBx对喂食HFD大鼠的影响,进行了生化代谢物、血液凝固分析和组织学分析。结果:在测量血清瘦素和载脂蛋白B/A水平的实验中,GBx处理减弱了HFD诱导的这些代谢物的升高(p < 0.05)。GBx处理组的脂联素和载脂蛋白E水平显著高于HFD组。所有GBx处理组的凝血酶原时间和活化部分凝血活酶时间均增加。在GBx处理组中,血清血栓素A2和血清素水平降低,血清纤维蛋白原降解产物浓度升高(p < 0.05)。此外,与血脂异常相关的动脉粥样硬化组织形态学改变通过GBx治疗得到显著改善。结论:这些结果表明,GBx可能通过调节与脂质代谢物相关的凝血因子来降低内膜-中膜厚度,从而改善喂食HFD大鼠的血流。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
研究人参浆果热水提取物(GBx)能否通过调节脂质代谢和血液凝固来改善高脂饮食(HFD)大鼠的血流。
核心机制
GBx可能通过降低血清血栓素A2和血清素水平,增加纤维蛋白原降解产物和凝血酶原时间/活化部分凝血活酶时间,从而调节凝血因子,并减轻主动脉内膜-中膜厚度,改善血流。
主要证据
通过血清生化检测、凝血和血小板功能分析、肝脏和主动脉组织学分析,发现GBx处理可降低HFD引起的瘦素和apoB/A升高,增加脂联素和apoE,延长PT和aPTT,降低TXA2和血清素,升高FDP,并改善主动脉内膜-中膜厚度和动脉粥样硬化病变。
研究意义
提示GBx可能作为改善血流和预防动脉粥样硬化的候选药物,但需要更系统的血流动力学研究来确认其有效性。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

动物模型建立与分组处理

建立高脂饮食诱导的肥胖/高脂血症大鼠模型,并评价GBx的干预效果。

5周龄雄性SD大鼠随机分为5组,对照组饲喂正常饮食,其余4组饲喂高脂饮食(D12451,45% kcal fat)11周,随后3个GBx组分别灌胃GBx 50、100、150 mg/kg/天,持续6周,对照组和HFD组灌胃等量蒸馏水。

2

血清脂质代谢物分析

检测GBx对高脂饮食诱导的脂质代谢紊乱的调节作用。

使用ELISA试剂盒测定血清瘦素、脂联素、载脂蛋白E、B/A、TXA2、血清素和FDP水平。

3

凝血功能分析

评估GBx对凝血途径的影响。

采集血浆,使用自动化凝血分析仪测定PT和aPTT。

4

血小板功能分析

评估GBx对血小板功能和聚集的影响。

使用血小板功能分析仪INNOVANCE PFA-200测定胶原/肾上腺素(Col/EPI)和胶原/ADP(Col/ADP)的闭合时间。

5

肝脏组织学分析

评估GBx对高脂饮食诱导的肝脏脂肪沉积和炎症的改善作用。

肝脏组织固定包埋,切片染色(H&E和油红O),使用自动图像分析测量脂肪变性面积、肝细胞直径等指标。

6

主动脉组织学分析

评估GBx对高脂饮食诱导的主动脉粥样硬化病变和内膜-中膜厚度的影响。

主动脉组织固定、切片、染色,测量主动脉壁总厚度、内膜、中膜厚度,以及脂质沉积面积和动脉粥样硬化斑块面积。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
高脂饲料D12451Research Diets Inc.--
正常饲料Zeigler Bros--
旋转真空蒸发器Daesung Machinery Co.--
冷冻干燥机PVTFA 10ATInshin Lab. Co. Ltd.--
高效液相色谱系统Agilent Technologies--
Hector-M C18色谱柱RS Tech Co.--
瘦素ELISA试剂盒R&D Systems--
脂联素ELISA试剂盒Shibayagi Co. Ltd.--
ELISA试剂盒(apoA、apoB100、apoE、TXA2、血清素、FDP)Elabscience Biotechnology Co. Ltd.--
自动化凝血分析仪Diagnostica Stago--
INNOVANCE PFA-200血小板功能分析仪Siemens Medical Solutions--
i-Solution FL 9.1版图像分析软件IMT i-Solution Inc.--

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
动物模型建立
大鼠品系、周龄、体重、分组、每组动物数、饮食类型及周期、GBx剂量与给药途径
阅读提示:Materials and Methods, section 2.1 (Animals and experimental diets)
血清生化检测
试剂盒来源、检测指标、样品处理方法
阅读提示:Materials and Methods, section 2.3 (Biochemical metabolite assay)
凝血功能检测
PT、aPTT测定仪器及方法
阅读提示:Materials and Methods, section 2.4 (Coagulation assays)
血小板功能检测
PFA-200分析仪、测试条件(Col/EPI、Col/ADP)、抗凝剂
阅读提示:Materials and Methods, section 2.5 (Platelet function assays)
组织学分析
染色方法(H&E、油红O)、图像分析软件、测量参数
阅读提示:Materials and Methods, section 2.6 (Histological analysis)