红细胞源性外泌体递送补体C5加剧脑出血后的神经炎症和神经元损伤

脑出血（ICH）诱导神经炎症和神经元损伤，部分由小胶质细胞坏死性凋亡和M1极化驱动。最近证据表明红细胞源性外泌体（RBC-Exos）参与炎症病理，但其在ICH中的作用尚不清楚。本研究探讨出血性RBC-Exos（ICH-Exos）如何通过补体信号调节小胶质细胞功能障碍和神经病理。通过流式细胞术（AnnexinV+CD235+）、透射电子显微镜、纳米颗粒跟踪分析和蛋白质印迹（CD63/TSG101）分离并验证RBC-Exos。体外，将血红素处理的小胶质细胞暴露于Normal-Exos或ICH-Exos。小鼠ICH模型通过组织学（H&E、尼氏染色）、粘附分子表达（ICAM-1/VCAM-1）和神经行为测试评估神经病理。蛋白质组学鉴定外泌体蛋白货物，辅以C5单克隆抗体（mAb）阻断实验以剖析机制通路。ICH-Exos加重了血红素诱导的小胶质细胞坏死性凋亡，表现为磷酸化RIPK1、RIPK3和MLKL上调，并加剧M1极化（CD86、iNOS、CCL2升高；CD163、ARG1抑制）。在ICH小鼠中，ICH-Exos加重脑出血、神经元丢失和神经行为缺陷，同时升高促炎细胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α）。蛋白质组学揭示C5在ICH-Exos中富集，与血清和脑组织中C5a水平升高相关。C5单抗中和了ICH-Exos的作用，挽救小胶质细胞活力，恢复M1/M2平衡，并减轻坏死性凋亡。在体内，C5抑制减少出血量，恢复神经元尼氏体，抑制ICAM-1/VCAM-1，并减轻MAPK通路激活（p-ERK1/2、p-p38）。总之，ICH-Exos通过促进C5依赖性小胶质细胞坏死性凋亡和M1极化驱动ICH后的神经炎症和神经元损伤。靶向C5/C5a轴对抗这些效应，提示一种改善ICH相关神经病理的新治疗策略。