探讨红景天苷通过抑制RIPK1/RIPK3/MLKL通路介导的胰腺腺泡细胞坏死性凋亡缓解大鼠急性胰腺炎的作用

背景：坏死性凋亡是一种受调控的细胞死亡形式，是急性胰腺炎（AP）中胰腺损伤的关键驱动因素。本研究探讨了红景天苷（Sal），一种以抗氧化特性著称的天然化合物，通过靶向坏死性凋亡通路缓解AP的潜力。方法：通过向胰管逆行灌注3.5%牛磺胆酸钠诱导Wistar大鼠AP模型。大鼠随机分为三组：假手术组、AP模型组和AP+Sal（60 mg/kg）组。测定血清淀粉酶（AMY）和炎症细胞因子（IL-6、IL-1β、TNF-α）水平，并评估胰腺组织损伤。通过Western blot、免疫组织化学（IHC）和透射电子显微镜（TEM）分析RIPK1/RIPK3/MLKL通路的参与和线粒体超微结构。使用雨蛙素（100 nM）在AR42J细胞中建立体外AP模型。细胞用Sal或Necrostatin-1（Nec-1）预处理，检测线粒体膜电位、坏死性凋亡相关蛋白表达和p-MLKL亚细胞定位。结果：Sal治疗显著降低了AP大鼠血清AMY水平（p < 0.01）和促炎细胞因子（IL-6、IL-1β、TNF-α；均p < 0.05）。组织病理学分析显示，Sal显著改善了胰腺组织水肿、炎症浸润和坏死（p < 0.01）。Western blot分析显示，Sal显著抑制了胰腺组织和AR42J细胞中关键坏死性凋亡相关蛋白（RIPK1、RIPK3和p-MLKL）的表达（均p < 0.05）。IHC和免疫荧光证实Sal有效抑制了p-MLKL膜转位（p < 0.01）。TEM进一步证明Sal保持了线粒体结构完整性。然而，在体外，Sal和Nec-1的组合未产生显著的叠加效应。结论：Sal通过靶向RIPK1/RIPK3/MLKL通路和保持线粒体功能抑制坏死性凋亡，从而减轻实验性AP。这些发现表明Sal是治疗AP的有前景的候选药物。