单细胞转录组分析揭示Ccl6+Ccr2+Arg1+巨噬细胞与急性肾损伤后肾间质纤维化的关联

背景：急性肾损伤（AKI）是重大健康负担，具有进展为慢性肾脏病（CKD）的高风险。肾纤维化是CKD进展的最终结局，其中M2巨噬细胞通过分泌促纤维化因子发挥关键作用。趋化因子可通过调节AKI过程中巨噬细胞的极化影响肾纤维化的进展。方法：对AKI后7天小鼠肾脏的单细胞转录组数据进行整合分析，以研究巨噬细胞间的配体-受体（LR）相互作用，并探讨AKI条件下巨噬细胞分化过程中的基因共表达模式。AKI模型通过单侧缺血再灌注损伤（uIRI）诱导，在第7天收集肾脏样本。采用qPCR和WB检测巨噬细胞中Ccl6、Ccr2和M2极化标志物的转录水平。采用Transwell实验评估Ccl6对BMDMs迁移的影响。使用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）评估细胞增殖。进行组织学分析以评估肾损伤和纤维化的程度。进行多重免疫荧光分析以评估Ccl6、Ccr2和Arg1表达的共定位。结果：通过对多个AKI单细胞转录组数据集的整合分析，我们确定了AKI后7天肾巨噬细胞中Ccl6和Ccr2之间的强相互作用。此外，在肾巨噬细胞中观察到Ccl6、Ccr2和Arg1的共表达，且Ccl6+Ccr2+Arg1+细胞的丰度与肾间质纤维化的严重程度呈正相关。Ccl6促进骨髓来源巨噬细胞（BMDMs）的迁移和M2极化。在AKI小鼠中抑制Ccr2可减少Arg1+巨噬细胞的浸润并减轻肾纤维化的进展。结论：靶向Ccl6/Ccr2轴可能减轻纤维化进展，并为预防AKI向CKD转变提供潜在的治疗见解，这一可能性需要通过未来的功能实验进一步验证。