抑制二酰甘油O-酰基转移酶1通过抑制缺血性卒中中的铁死亡提供神经保护

背景：二酰甘油O-酰基转移酶1（DGAT1）对甘油三酯合成至关重要，但其在缺血性卒中中的作用仍不清楚。本研究利用大脑中动脉闭塞（MCAO）大鼠模型和高度分化的PC12细胞进行氧-葡萄糖剥夺/再复氧（OGD/R）处理，研究DGAT1在缺血性卒中中的作用。方法：使用Zea-Longa评分和2,3,5-三苯基氯化四氮唑（TTC）染色评估DGAT1抑制在MCAO大鼠中的治疗效果。使用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）和乳酸脱氢酶（LDH）测定评估对OGD/R处理的高度分化PC12细胞的影响。使用透射电子显微镜评估铁死亡相关的线粒体损伤。此外，通过免疫组织化学、免疫荧光、Western blotting、qPCR、JC-1测定和活性氧（ROS）检测进一步探讨DGAT1抑制调节铁死亡的机制。结果：在MCAO和OGD/R模型中，DGAT1表达均升高。DGAT1抑制剂A 922500改善了MCAO大鼠的神经功能缺损，减少了梗死体积和神经元丢失，同时增强了OGD/R处理的PC12细胞的细胞活力并降低了LDH水平。DGAT1抑制显著减轻了MCAO大鼠的铁死亡，表现为（i）线粒体缩短和嵴破坏减少，（ii）4-HNE水平降低，（iii）MDA降低和SOD升高，以及（iv）炎症因子（IL-6、MCP-1和TNF-α）水平降低。此外，体内和体外实验均显示DGAT1抑制显著增加Gpx4水平，而慢病毒递送的Gpx4 shRNA显著逆转了其有益作用。在MCAO大鼠中，Gpx4 shRNA显著升高4-HNE水平并加剧铁死亡相关的线粒体损伤。在体外，DGAT1抑制增加了线粒体膜电位并减少了ROS，而线粒体功能抑制剂鱼藤酮降低了Gpx4并损害了细胞活力。此外，DGAT1抑制显著上调了关键β-氧化基因Cpt1a，而β-氧化抑制剂依托莫司降低了细胞活力和线粒体膜电位，增加了ROS，并下调了Gpx4。结论：我们的研究表明，DGAT1抑制可能增强β-氧化和线粒体功能，从而增加Gpx4水平，抑制铁死亡，并最终在缺血性卒中中发挥神经保护作用。