确定乳酸阈值速度(VLT)
为急性剧烈运动处方外部负荷,以诱导高乳酸血症和代谢性酸中毒。
所有马进行标准化运动测试(SET),通过目测法和双段线性回归确定VLT,并取两者中的较高速度作为AIEB负荷。
Acute whole-body vibration as a recovery strategy did not alter the content of gluteus medius monocarboxylate-transporters, lactatemia, and acidosis induced by intense exercise in horses.
研究包含标准运动测试、急性运动、三种恢复策略(跑步机、WBV、假手术)的交叉设计,并检测了生理指标和肌肉蛋白表达,但无功能验证或机制验证。
杂交马(8匹,平均体重406±33 kg) 臀中肌肌肉活检样本
马匹品种:杂交马(crossbred horses),8匹(1匹去势公马,7匹母马) 急性剧烈运动(AIEB)负荷:以VLT的110%和130%强度各跑2分钟和3分钟,坡度5% WBV频率序列:76, 66, 55, 46, 32 Hz,每步2分钟,总时长10分钟 恢复策略:WBVG和SG在AIEB后约5分钟开始恢复,TG在跑步机上等待5分钟 样本量:每组8只,交叉设计,洗脱期7天
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
为急性剧烈运动处方外部负荷,以诱导高乳酸血症和代谢性酸中毒。
所有马进行标准化运动测试(SET),通过目测法和双段线性回归确定VLT,并取两者中的较高速度作为AIEB负荷。
募集快肌纤维,诱导生理性高乳酸血症和代谢性酸中毒。
马进行AIEB,包括热身、慢跑和跑步机上的疾驰,以VLT以上强度进行。
比较跑步机主动恢复、全身振动和假手术恢复对生理变量的影响。
AIEB后,马被随机分配到TG、WBVG和SG组,进行10分钟的恢复。
评估恢复策略对心血管、代谢和酸碱状态的影响。
在多个时间点测量心率、直肠温度、血浆乳酸和葡萄糖、血液气体和电解质、强离子差。
评估恢复策略对臀中肌MCT1和MCT4蛋白含量的影响。
在基线、恢复后、3小时和6小时进行臀中肌活检,通过Western blot分析MCT1和MCT4蛋白含量。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 运动测试和运动 | Galloper G 5500跑步机 | Sahinco | -- |
| 全身振动恢复 | TheraPlate® 马用振动平台(型号K21) | TheraPlate | -- |
| 心率监测 | Polar马用心率监测器 | Polar Electro | -- |
| 直肠温度测量 | 数字预测温度计 | Relaxmedic | RM-TD0403A |
| 乳酸和血糖分析 | YSI 2300 Stat Plus®生化分析仪 | YSI | -- |
| 血液气体和电解质分析 | i-STAT便携式分析仪 | Abbott Laboratories | -- |
| 蛋白提取 | RIPA裂解缓冲液 | -- | -- |
| 蛋白酶和磷酸酶抑制剂混合物 | Sigma Aldrich | P8340 | |
| 磷酸酶II抑制剂混合物套装 | Calbiochem | US1524625-1SET | |
| Q55超声破碎仪 | Qsonica | -- | |
| 5424 R离心机 | Eppendorf | -- | |
| 电泳 | Mini Protean TGX预制胶,10% 15孔 | Bio-Rad | -- |
| PowerPac 300电泳电源 | Bio-Rad | -- | |
| 转膜 | iBlot™ 2干转仪 | Life Technologies | IB21001 |
| iBlot™ 2转膜耗材 | Invitrogen | IB24002 | |
| Western blot | RevertTM总蛋白染料 | LI-COR | 926-11010 |
| 脱脂奶粉 | Cell Signaling Technology | 9999 | |
| MCT4抗体 | Bioss | BS-2698R | |
| MCT1抗体 | Proteintech | 20139-I-AP | |
| 山羊抗兔IgG H&L(IRDye 800CW) | Abcam | ab216773 | |
| LI-COR Odyssey Fc成像系统 | LI-COR Biosciences | -- | |
| 肌肉活检 | 6.0毫米Bergström型活检针 | -- | -- |
| 盐酸利多卡因 | -- | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 马匹选择和管理 | 品种:杂交马;年龄7-19岁;体重406±33 kg;性别;马匹准备(约2个月适应期) 阅读提示:详见2.1 Horses |
| 确定乳酸阈值(VLT) | 跑步机速度和坡度;心率终止标准(200 bpm);VLT确定方法(目测和双段线性回归) 阅读提示:详见2.2 Determination of the velocity corresponding to the lactate threshold |
| 急性剧烈运动(AIEB) | 热身时间、速度、坡度;各阶段速度、时间和坡度;VLT百分比 阅读提示:详见2.3 Acute intense exercise bout |
| 恢复策略 | TG速度;WBV频率和时长;SG设备关闭;开始恢复的延迟时间 阅读提示:详见2.4 Experimental groups和2.5 Acute whole-body vibration session |
| 生理指标测量 | 心率测量时间点和设备;直肠温度测量时间点;乳酸和血糖采样时间点;血液气体和电解质采样时间点 阅读提示:详见2.6 Assessment methods |
| 肌肉活检和Western blot | 活检时间点、肌肉部位、深度;蛋白提取量、缓冲液成分;电泳条件;抗体浓度;成像系统 阅读提示:详见2.6.5 Muscle samples和2.6.5.1 Biomolecular analyzes |