茯苓来源的类外泌体纳米囊泡通过促进线粒体自噬和抑制NLRP3炎症小体活化减轻代谢功能障碍相关脂肪性肝病

代谢功能障碍相关脂肪性肝病（MAFLD）影响全球约四分之一的成年人，目前尚无有效的治疗药物。茯苓作为一种真菌，作为草药和食品营养物已有数百年历史，并用于治疗MAFLD。类外泌体纳米囊泡具有多种药理活性；然而，关于茯苓来源的类外泌体纳米囊泡（PCELNs）对MAFLD作用的研究尚缺乏。因此，本研究旨在明确PCELNs对MAFLD的作用及机制。通过超速离心法分离PCELNs，并表征其形态，如粒径、zeta电位、蛋白分布以及脂质和miRNA组成。然后，在体内和体外观察PCELNs的吸收和分布。最后，利用脂肪乳诱导的L02细胞脂肪变性模型和高脂饮食（HFD）诱导的MAFLD小鼠模型评估PCELNs对MAFLD的作用和机制。PCELNs为膜结构囊泡，粒径为161.4 ± 1.7 nm，zeta电位为−3.20 ± 0.37 mV，并含有多种蛋白质、脂质和miRNA。PCELNs可被L02细胞吸收，腹腔注射后靶向肝脏和脾脏。PCELNs抑制体重增加，改善心脏、肝脏、脾脏和各种脂肪的指数，并降低脂质积累和脂质水平。它们还保护线粒体超微结构，并调节氧化应激和能量代谢紊乱。此外，PCELNs增加肝脏中PTEN诱导激酶1（PINK1）、E3泛素连接酶（Parkin）和微管相关蛋白轻链3（LC3）的蛋白表达，降低肝脏线粒体和细胞质中氧化型线粒体DNA（Ox-mtDNA）含量，降低肝脏中核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）、前体半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1（caspase-1）、cleaved-caspase-1和成熟白细胞介素-1β（IL-1β）的蛋白表达，并降低血清和肝脏中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）、IL-1β和白细胞介素-18（IL-18）的水平。总之，我们证明PCELNs可能通过促进线粒体自噬和抑制NLRP3炎症小体活化来减轻HFD诱导的MAFLD。