和营五子方通过HIF-1α/BNIP3/NIX轴促进线粒体自噬减轻糖尿病视网膜病变

背景：糖尿病视网膜病变（DR）是糖尿病患者视力问题的主要原因。和营五子方（HYWZF）对DR有效。目的：确定HYWZF的预防机制，特别是线粒体自噬相关机制。方法：人类视网膜毛细血管内皮细胞（HRCECs）在体外用高糖（hg）、HYWZF血清、PX-478或Mdivi-1处理。然后，使用细胞计数试剂盒-8、transwell和管形成实验分别评估HRCEC的增殖、侵袭和管形成能力。使用透射电子显微镜评估线粒体形态，使用Western blotting测定蛋白质水平。使用流式细胞术评估细胞凋亡、活性氧（ROS）产生和线粒体膜电位。此外，使用链脲佐菌素建立C57BL/6小鼠体内模型，并用HYWZF治疗四周。持续监测血糖水平和体重。使用苏木精和伊红、甲酚紫和高碘酸-希夫染色评估视网膜特征的变化。通过Western blotting、免疫组织化学和免疫染色测定视网膜组织中的蛋白质水平。结果：HYWZF在体外通过线粒体自噬抑制了hg诱导的HRCECs中过度的ROS产生、凋亡、管形成和侵袭。它增加了BCL2相互作用蛋白3（BNIP3）、FUN14结构域包含1、BNIP3样（BNIP3L，也称为NIX）、PARKIN、PTEN诱导激酶1和缺氧诱导因子（HIF）-1α的mRNA表达水平。此外，它下调了血管内皮细胞生长因子的蛋白水平，并增加了轻链3-II/I的比值。然而，PX-478和Mdivi-1逆转了这些效应。此外，PX-478和Mdivi-1通过减少氧化应激和凋亡以及增加线粒体自噬来抵消HYWZF的作用。HYWZF干预改善了体内糖尿病症状、组织损伤、无细胞毛细血管数量和氧化应激。此外，体内实验证实了体外实验的结果。结论：HYWZF通过HIF-1α/BNIP3/NIX轴促进线粒体自噬，从而减轻DR及相关损伤。