骨髓间充质干细胞外泌体中的miR-223-3p靶向HDAC2下调STAT3磷酸化减轻HBx诱导的足细胞铁死亡

背景：乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎（HBV-GN）是中国主要的继发性肾脏疾病之一，骨髓间充质干细胞来源的外泌体（BMSC-Exo）中的微小RNA（miRNA）可以减轻HBV-X蛋白（HBx）诱导的肾足细胞铁死亡，但确切机制仍不清楚。本研究旨在探讨BMSC-Exo中miR-223-3p在HBx诱导的足细胞铁死亡中的保护机制。方法：研究采用人肾足细胞（HPCs）、骨髓间充质干细胞（BMSCs）以及C57BL/6小鼠和HBx转基因小鼠的肾组织。首先，通过在体内和体外给予信号转导和转录激活因子3（STAT3）磷酸化抑制剂，验证了STAT3磷酸化与铁死亡之间的相关性。此外，还检测了HDAC2过表达对STAT3磷酸化的影响。随后，评估了携带miR-223-3p的BMSC-Exo、HDAC2和STAT3磷酸化与HBx诱导的HPCs铁死亡和损伤之间的关联。通过RNA免疫沉淀实验证实了miR-223-3p与HDAC2之间的相互作用。采用细胞计数试剂盒-8实验、蛋白质印迹、RT-qPCR、免疫荧光、流式细胞术、脂质过氧化检测试剂盒、铁检测试剂盒、透射电子显微镜和苏木精-伊红染色等多种技术来观察HBx诱导的足细胞损伤和铁死亡在体内和体外的程度。结果：通过抑制HBx诱导的足细胞中STAT3的磷酸化，可以减轻足细胞铁死亡。相反，上调HDAC2可以增强STAT3磷酸化，从而促进足细胞铁死亡。MiR-223-3p能够直接负性调节HDAC2的表达。携带miR-223-3p的BMSC-Exo能有效抑制HDAC2的表达，最终通过靶向HDAC2并下调STAT3磷酸化减轻HBx诱导的足细胞铁死亡。结论：本研究证明了BMSC-Exo介导的miR-223-3p递送在减轻HBx诱导的足细胞铁死亡方面的潜力，从而为治疗HBV-GN和减轻肾损伤提供了新的治疗靶点和途径。