冲骨颗粒通过miR-148a-3p/Wnt/β-catenin通路改善膝骨关节炎软骨基质代谢

目的：本研究旨在探讨冲骨颗粒（CGG）对大鼠膝骨关节炎（KOA）的作用及其潜在机制。方法：建立木瓜蛋白酶诱导的KOA大鼠模型。通过苏木精-伊红（H&E）染色观察大鼠软骨组织细胞外基质的病理变化，并用Mankin评分进行定量评分。在透射电子显微镜（TEM）下观察软骨细胞外基质的超微结构。ELISA检测大鼠血清中IL-6、TNF-α和IL-1β的水平。免疫荧光检测大鼠软骨中MMP-3、MMP-13和Col2al的水平。Western blot检测大鼠软骨中wnt1、GSK-3β、β-catenin和Aggrecan的蛋白表达。RT-PCR检测大鼠软骨中miR-148a-3p、wnt1、β-catenin和GSK-3β的mRNA相对表达。荧光素酶报告基因检测miR-148a-3p的靶基因。结果：与模型组相比，H&E、Mankin评分和TEM数据显示CGG显著改善了关节软骨组织和细胞外基质代谢。此外，低、中、高剂量的CGG不同程度地降低了血清中IL-6、TNF-α、IL-1β、MMP-3和MMP-13的水平，但增加了Col2al和Aggrecan的水平。机制上，CGG通过剂量依赖性地增加miR-148a-3p的表达来靶向wnt1，从而下调软骨组织中β-catenin的mRNA和蛋白表达，并上调GSK-3β的mRNA和蛋白表达。结论：CGG可能通过控制miR-148a-3p/wnt/β-catenin信号通路来降低其下游靶基因MMP-13和MMP-3的水平，增加Col2al和Aggrecan的表达，并下调炎症细胞因子IL-6、TNF-α和IL-1β的含量，从而改善软骨细胞外基质的代谢并减轻KOA中关节软骨的退变。