样本收集与分组
获取不同子宫内膜组织样本以检测目标蛋白表达。
收集2000-2007年河北医科大学第四医院行子宫切除术患者的石蜡组织,按WHO标准分类,包括50例子宫内膜腺癌、3例乳头状腺癌、15例子宫内膜增生,并以15例正常子宫内膜作为对照。
Expression and clinical significance of HER2/neu, aromatase P450 and adhesion molecule CD24 in endometrial cancer.
仅采用免疫组化检测临床组织样本,未进行功能或机制验证,属于观察性分析。
子宫内膜增生组织 子宫内膜癌组织(包括腺癌和乳头状腺癌) 正常子宫内膜组织
样本类型和分组:15例正常子宫内膜、15例子宫内膜增生、50例子宫内膜腺癌、3例子宫乳头状腺癌 染色判定标准:阳性细胞百分比<10%为阴性,10%-25%为(+),25%-50%为(++),>50%为(+++) 统计分析:χ2检验和Spearman相关分析,p<0.05为差异有统计学意义
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
获取不同子宫内膜组织样本以检测目标蛋白表达。
收集2000-2007年河北医科大学第四医院行子宫切除术患者的石蜡组织,按WHO标准分类,包括50例子宫内膜腺癌、3例乳头状腺癌、15例子宫内膜增生,并以15例正常子宫内膜作为对照。
检测芳香化酶P450、CD24和HER2/neu在各组组织中的表达。
石蜡切片脱蜡后行抗原修复,用一抗4℃孵育过夜,二抗孵育1小时,DAB显色,显微镜下观察。
对免疫组化染色结果进行半定量分析。
由经验丰富的病理医生盲法评估每张切片5个视野,根据阳性细胞百分比判定阴阳性及等级。
分析不同组间表达差异及指标间相关性。
采用SPSS12.0软件,多样本间比较用双向χ2检验,相关分析用Spearman相关分析。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 免疫组化 | 抗芳香化酶小鼠多克隆抗体 | 北京博奥森生物技术有限公司 | -- |
| 兔抗C-erB-2抗体 | 北京博奥森生物技术有限公司 | -- | |
| 抗CD24羊多克隆抗体 | Santa Cruz Biotechnology | -- | |
| 二抗 | 北京中杉金桥生物技术有限公司 | -- | |
| DAB显色试剂盒 | 北京中杉金桥生物技术有限公司 | -- | |
| 奥林巴斯IX71显微镜 | Olympus | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 样本收集 | 样本来源、组织类型、病理分类标准、排除标准 阅读提示:Materials and Methods, Samples |
| 免疫组化染色 | 一抗浓度、抗原修复条件、封闭条件、显色试剂盒 阅读提示:Materials and Methods, Immunohistochemical method |
| 染色评估 | 阳性判定标准、评估视野数、评估者盲法 阅读提示:Materials and Methods, Evaluation of immunohistochemical staining |
| 统计分析 | 统计方法、显著性水平 阅读提示:Materials and Methods, Statistical analysis |