一种新的分离方法揭示了阿尔茨海默病小鼠模型中性别特异的小细胞外囊泡组成和神经毒性。

我们开发了一种新的方法，从雄性和雌性野生型和5xFAD小鼠脑中分离小细胞外囊泡（sEVs），以研究sEVs在阿尔茨海默病（AD）中的性别特异功能。质谱分析显示，sEVs含有对EV形成和Aβ至关重要的蛋白质。ExoView分析显示，雌性小鼠含有更多的GFAP和Aβ标记的sEVs，表明雌性脑来源的sEVs更大比例来源于星形胶质细胞和/或更可能结合Aβ。此外，雌性脑来源的sEVs含有更多的酸性鞘磷脂酶（ASM）和神经酰胺，它们分别是EV形成和Aβ与EV结合的重要酶及其鞘脂产物。我们使用共标记和邻位连接实验证实了ASM在EV形成和Aβ结合中的功能，表明ASM抑制剂阻止了原代培养星形胶质细胞中Aβ与神经酰胺复合物的形成。最后，我们的研究表明，来自雌性5xFAD小鼠的sEVs比雄性更具神经毒性，通过线粒体功能受损（Seahorse测定）和LDH细胞毒性测定确定。我们的研究表明，性别特异的sEVs是AD的功能性差异标志物，ASM是AD治疗的潜在靶点。