样本收集与固定
获取并固定来自绝经前和绝经后女性的输卵管组织样本。
从50名女性(25名绝经前和25名绝经后)获取输卵管壶腹部和漏斗部伞部活检样本,并立即固定。
Immunohistochemical and Scanning Electron Microscopic Confirmation of the Lymphatic Lacunae in the Uterine Tube Mucosal Folds. What Are the Clinical Implications?
包含人体样本的免疫组化和SEM观察,以及不同绝经状态的比较,但缺乏功能验证或机制验证。
输卵管壶腹部和漏斗部伞部组织样本(来自绝经前和绝经后女性)
样本来源:25名绝经前和25名绝经后女性的输卵管壶腹部和漏斗部伞部活检样本 固定条件:免疫组化样本在10%福尔马林中固定24小时;SEM样本在3%戊二醛中固定4小时 抗体:抗podoplanin(克隆D2–40)和抗VEGFR-3,按制造商说明书稀释 观察方法:免疫组化使用Leica DM3000LED显微镜,SEM使用ZEISS EVO LS 15
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
获取并固定来自绝经前和绝经后女性的输卵管组织样本。
从50名女性(25名绝经前和25名绝经后)获取输卵管壶腹部和漏斗部伞部活检样本,并立即固定。
检测淋巴管内皮细胞标志物以确认淋巴陷凹的存在。
使用podoplanin(D2–40)和VEGFR-3抗体进行免疫组化染色,并用EnVision系统显色。
观察淋巴陷凹的超微结构。
对样本进行临界点干燥、镀金,然后使用SEM检查。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 免疫组织化学 | D2-40抗体 | Agilent DAKO | M3619 |
| VEGFR-3抗体 | Bioss | BS-2202R | |
| EnVision FLEX显色系统 | Agilent Technologies | -- | |
| Leica DM3000LED光学显微镜 | Leica | -- | |
| FLEXCAM C3数码相机 | FLEXCAM | -- | |
| 扫描电子显微镜 | ZEISS EVO LS 15扫描电子显微镜 | ZEISS | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 样本收集 | 样本来源:25名绝经前和25名绝经后女性;获取部位:输卵管壶腹部和漏斗部伞部 阅读提示:Material and Methods: Patients and uterine tube samples |
| 免疫组织化学 | 固定条件:10%福尔马林24小时;抗原修复:柠檬酸盐缓冲液煮沸;抗体稀释:按制造商说明书;显色系统:EnVision FLEX 阅读提示:Material and Methods: Immunohistochemical staining |
| 扫描电子显微镜 | 固定:3%戊二醛4小时;后固定:四氧化锇;脱水:梯度乙醇至100%;干燥:临界点干燥;镀膜:15nm金/钯层 阅读提示:Material and Methods: Scanning electron microscopy (SEM) |