患者纳入与分组
比较接受化疗免疫治疗与未接受治疗的患者在肿瘤微环境标志物上的差异
纳入18例晚期食管鳞状细胞癌患者,分为治疗组(接受信迪利单抗联合化疗)和同期对照组(未接受术前治疗),收集手术切除的肿瘤、瘤旁和淋巴结组织样本。
Impact of the combination of sintilimab and chemotherapy on the tumor and paratumor PD-L1, IDO, TIM-3, FOXP3+ and CD8 expressions in patients with advanced esophageal squamous cell carcinoma.
研究包含患者样本的免疫组化检测及统计分析,但缺乏功能实验和机制验证,属于观察性研究。
晚期食管鳞状细胞癌患者肿瘤组织 瘤旁组织 淋巴结组织
治疗组患者接受信迪利单抗200mg每3周、顺铂40mg D1-3、白蛋白结合型紫杉醇300mg D1的化疗免疫治疗; 对照组患者未接受术前治疗; 样本分为肿瘤、瘤旁和淋巴结三类组织; 每个指标免疫组化染色后测量积分光密度(IOD)和荧光面积,取3个高倍视野平均值; 统计分析采用Spearman相关、Kruskal-Wallis检验或Friedman秩和检验,p<0.05为显著。
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
比较接受化疗免疫治疗与未接受治疗的患者在肿瘤微环境标志物上的差异
纳入18例晚期食管鳞状细胞癌患者,分为治疗组(接受信迪利单抗联合化疗)和同期对照组(未接受术前治疗),收集手术切除的肿瘤、瘤旁和淋巴结组织样本。
检测肿瘤、瘤旁和淋巴结组织中PD-L1、IDO、CD8、TIM-3和FOXP3+的表达
对FFPE组织切片进行免疫组化染色,使用特异性抗体检测各标志物。
定量分析各标志物的表达水平
手动测量各标志物的积分光密度(IOD)和荧光面积,取三个高倍视野的平均值。
比较不同组间标志物表达差异及标志物间相关性
使用Spearman相关分析标志物间的相关性,使用Kruskal-Wallis检验或Friedman秩和检验比较组间差异,使用单因素和多因素线性回归分析临床变量与CD8表达的关系。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 患者分组与样本收集 | 治疗组患者接受信迪利单抗200mg每3周、顺铂40mg D1-3、白蛋白结合型紫杉醇300mg D1,共2-3周期;对照组未接受术前治疗;样本包括肿瘤、瘤旁和淋巴结组织。 阅读提示:Methods: Patients and tissue sample collection |
| 免疫组化染色 | 各标志物抗体稀释度、品牌、货号;染色组织类型(肿瘤/瘤旁/淋巴结);仪器为Dako。 阅读提示:Methods: Immunohistochemistry (IHC) staining |
| 表达定量 | 每个样本测量三个高倍视野(0.055mm直径)的IOD和面积,取平均值;视野选择基于最高表达密度区域。 阅读提示:Methods: Expression density measurement |
| 统计分析 | 相关性分析用Spearman相关;组间比较用Kruskal-Wallis或Friedman检验;p<0.05为显著;使用软件SPSS 18.0、R 3.5.3、GraphPad Prism。 阅读提示:Methods: Statistical analysis |