Toll样受体通过影响免疫微环境作为肾透明细胞癌早期诊断和预后评估的生物标志物：综合生物信息学分析结合实验验证

背景：Toll样受体（TLRs）是先天性和获得性免疫反应的重要启动因子。然而，其在肾透明细胞癌（KIRC）中的作用尚不清楚。方法：通过ONCOMINE、UALCAN、GEPIA、cBioPortal、GeneMANIA、FunRich、LinkedOmics、TIMER和TRRUST详细研究了TLRs及其与KIRC的关系。此外，我们使用临床样本通过实时荧光定量聚合酶链反应（RT-qPCR）、流式细胞术（FC）和免疫组织化学（IHC）验证了TLR3和TLR4在KIRC早期阶段的表达。结果：与邻近正常组织相比，KIRC中TLRs的表达水平普遍不同。此外，TLR3和TLR4在KIRC早期阶段的表达显著升高。KIRC患者中TLR1、TLR3、TLR4和TLR8的过表达与更长的总生存期（OS）相关，而TLR9表达的抑制与更长的OS相关。此外，KIRC患者中TLR1、TLR3和TLR4的过表达与更长的无病生存期（DFS）相关。KIRC中TLRs存在普遍的遗传改变和明显的共表达相关性。TLRs之间的PPI网络相当复杂，连接TLRs相互作用的关键基因是MYD88。GO分析和KEGG通路分析表明，TLRs与适应性免疫、固有免疫和其他免疫相关过程密切相关。RELA、NFKB1、IRF8、IRF3和HIF1A是调控TLRs表达的关键转录因子。此外，KIRC中所有TLRs的表达水平与树突状细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、B细胞、CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的浸润水平呈正相关。最后，RT-qPCR、FC和IHC的结果证实，TLR3和TLR4在KIRC早期阶段显著升高。结论：KIRC的发生发展可能与TLRs密切相关，TLRs有潜力成为KIRC的早期诊断生物标志物以及判断KIRC预后和免疫状态的生物标志物。本研究可能为KIRC免疫治疗靶点的选择提供新的见解。