纤溶酶原激活物抑制剂1的免疫反应性及其与子宫腺肌病痛经和病灶纤维化的相关性

Immunoreactivity of Plasminogen Activator Inhibitor 1 and Its Correlation with Dysmenorrhea and Lesional Fibrosis in Adenomyosis.

作者信息Bingxin Yang, Nihao Gu, Shu Shi, Chen Zhang, Lan Chen, Jing Ouyang, Yu Lin, Feng Sun, Hong Xu
PMID33683668
发布时间2021-08
DOI10.1007/s43032-021-00513-6

实验完整度

研究包括临床样本收集、免疫组化、Masson染色及相关性分析和逻辑回归,但未进行功能或机制干预实验,证据层级较单一。

主要模型

子宫腺肌病患者异位内膜组织 子宫腺肌病患者在位内膜组织 无子宫腺肌病患者的正常内膜组织

重点核对

样本来源:国际和平妇幼保健院2018-2019年收集的45例子宫腺肌病异位和在位内膜及40例对照内膜 PAI-1抗体:兔多克隆抗体bs-6562R,稀释比例1:400 PAI-1表达定量:平均光密度(MOD)值,通过Image-Pro Plus 6.0分析 分组:按VAS评分分为无至轻度痛经(VAS=0-3)和中重度痛经(VAS=4-10) 统计:二元逻辑回归调整年龄、月经周期、孕次和产次,并使用IPW方法

摘要

子宫腺肌病与痛经、不孕和病灶纤维化相关,但其发病机制尚不清楚。纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)在肿瘤转移和子宫内膜异位症等病理活动中发挥重要作用。我们的目的是研究PAI-1在子宫腺肌病在位和异位内膜以及无子宫腺肌病内膜中的表达和定位,并探讨PAI-1免疫反应性与子宫腺肌病痛经严重程度和病灶纤维化程度的关系。PAI-1在子宫腺肌病异位内膜中的表达显著高于其在子宫腺肌病在位内膜和对照组内膜中的表达。异位PAI-1表达与子宫腺肌病痛经视觉模拟评分(VAS)和病灶纤维化程度呈正相关。高PAI-1表达增加了子宫腺肌病中重度痛经的可能性。这些结果表明PAI-1参与子宫腺肌病相关的痛经和病灶纤维化,为治疗有症状的子宫腺肌病提供了潜在靶点。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
PAI-1在子宫腺肌病在位和异位内膜中的表达和定位如何,以及其与痛经严重程度和病灶纤维化程度的相关性如何?
核心机制
PAI-1可能通过促进纤维蛋白和细胞外基质沉积,限制异位内膜的侵袭和蛋白水解活性,从而参与子宫腺肌病病灶形成和纤维化;同时可能通过促进炎症参与痛经。
主要证据
免疫组化显示异位内膜腺上皮和间质中PAI-1表达显著高于在位内膜和对照组;相关分析显示异位PAI-1表达与VAS评分和纤维化程度正相关;二元逻辑回归和IPW分析表明高PAI-1表达增加中重度痛经风险。
研究意义
PAI-1可能是治疗有症状子宫腺肌病的潜在靶点。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

样本收集与临床资料统计

获取子宫腺肌病和对照子宫内膜样本,并评估临床特征以控制混杂因素。

收集45例子宫腺肌病患者异位和在位内膜及40例对照内膜,记录年龄、月经周期、孕次、产次、痛经VAS评分和月经量。

2

免疫组化检测PAI-1表达

检测PAI-1在在位和异位内膜及对照内膜中的表达和定位。

对石蜡切片进行免疫组化染色,使用PAI-1兔多克隆抗体,通过Image-Pro Plus 6.0分析平均光密度。

3

Masson染色评估纤维化

评估子宫腺肌病病灶中胶原纤维沉积程度。

使用Masson三色染色检测胶原纤维,并通过Image-Pro Plus 6.0计算蓝色胶原纤维面积比例。

4

相关性分析

评估PAI-1表达与痛经严重程度和纤维化程度的关系。

计算PAI-1 MOD值与VAS评分及纤维化程度的相关性,使用Pearson或Spearman相关系数。

5

逻辑回归和IPW分析

评估PAI-1表达对中重度痛经风险的影响,并调整混杂因素。

将患者分为无至轻度痛经和中重度痛经两组,进行二元逻辑回归,并使用IPW方法调整协变量。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
PAI-1兔多克隆抗体Biossbs-6562R
Masson三色染色试剂盒RIBIOLOGY--
Image-Pro Plus 6.0Media Cybernetics, Inc.--
显微镜LeicaDM2000

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
样本收集
样本来源:2018-2019年,国际和平妇幼保健院;子宫腺肌病组45例,对照组40例;样本处理:10%缓冲福尔马林固定,石蜡包埋
阅读提示:Materials and Methods中的Sample Collection部分
免疫组化
切片厚度4μm;抗原修复:微波加热柠檬酸盐水15分钟;一抗:PAI-1兔多克隆抗体bs-6562R,稀释1:400,4°C过夜;二抗;DAB和苏木素染色;定量:Image-Pro Plus 6.0计算平均光密度
阅读提示:Materials and Methods中的Immunohistochemistry部分及图1图注
Masson染色
Bouin溶液37°C浸泡2小时;Masson三色染色试剂盒;胶原纤维面积比例计算
阅读提示:Materials and Methods中的Masson's Trichrome Staining部分及图2图注
统计分析
分组:VAS=0-3无至轻度,VAS=4-10中重度;调整变量:年龄、月经周期、孕次、产次;逻辑回归和IPW分析
阅读提示:Materials and Methods中的Statistical Analysis部分及表2