Tisp40通过NF-κB信号传导诱导肾缺血再灌注损伤中肾小管上皮细胞GSDMD介导的焦亡

肾缺血再灌注损伤（IRI）是急性肾损伤（AKI）的主要原因。作为转录因子，在精子发生过程中诱导的转录物40（Tisp40）已被发现参与肾IRI。然而，Tisp40在肾IRI肾小管上皮细胞（TEC）焦亡中的作用尚不清楚。在本研究中，我们通过体内苏木精-伊红（HE）染色、末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记（TUNEL）测定、免疫组织化学（IHC）、逆转录定量PCR（RT-qPCR）和蛋白质印迹分析，以及体外氧糖剥夺/复氧（OGD/R）刺激的TCMK-1细胞通过乳酸脱氢酶（LDH）释放测定、CCK-8测定、酶联免疫吸附测定（ELISA）、流式细胞术分析、免疫荧光染色、RT-qPCR和蛋白质印迹分析，研究了Tisp40对肾IRI中GSDMD介导的TEC焦亡的影响及其潜在分子机制。我们发现Tisp40和GSDMD-N的表达水平逐渐升高，并在体内30分钟缺血/24小时再灌注和体外24小时OGD/6小时复氧时达到峰值，同时TEC焦亡和肾损伤水平相应增加。Pearson相关分析数据显示Tisp40和GSDMD-N的表达呈正相关。此外，Tisp40过表达加重了OGD/R刺激的TCMK-1细胞中TEC焦亡率，并增加了相关蛋白的表达，包括GSDMD-N、NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18，而用靶向Tisp40的小干扰RNA（siRNA）处理的细胞则相反。与野生型小鼠相比，Tisp40缺陷小鼠表现出减轻的肾IRI和焦亡。此外，Tisp40敲除显著降低了GSDMD-N、IL-1β、IL-18、NLRP3和caspase-1的表达水平，并减轻了I/R诱导的肾焦亡。重要的是，Tisp40过表达通过p-p65激活显著增加了TECs焦亡，然而，Tisp40过表达的作用被小白菊内酯（PTL）部分阻断。总的来说，我们的发现为Tisp40如何调节肾IRI中GSDMD介导的焦亡机制提供了见解。