队列建立与样本收集
建立不同病因的HCC及对照人群队列,并收集血清样本。
从3家医院招募受试者,根据病因和临床诊断分为HCC、CH、LC和健康对照。采集静脉血,离心后储存血清。
Diagnostic value of 5 serum biomarkers for hepatocellular carcinoma with different epidemiological backgrounds: A large-scale, retrospective study.
包含多中心回顾性队列(训练集和验证集)、ELISA检测、免疫组化染色和基于KM plotter的生物信息学分析,且对主要结论进行了独立验证。
肝细胞癌患者血清样本 慢性肝炎患者血清样本 肝硬化患者血清样本 健康对照血清样本
HCC诊断依据:超声、CT或MRI并经组织病理学确认 分组:NBNC-HCC(乙肝表面抗原和丙肝抗体阴性)与健康对照组;HBV-HCC/HCV-HCC与CH和LC组 检测方法:ELISA试剂盒,双复孔 训练队列(n=468)和验证队列(n=453) 统计方法:Mann-Whitney U检验,二元logistic回归
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
建立不同病因的HCC及对照人群队列,并收集血清样本。
从3家医院招募受试者,根据病因和临床诊断分为HCC、CH、LC和健康对照。采集静脉血,离心后储存血清。
测量5种血清生物标志物水平,评估其单独诊断HCC的能力。
使用ELISA试剂盒检测血清中的AFP、AFU、GGT-II、GPC3和HGF水平。
确定最佳血清标志物组合,并评估其诊断准确性。
基于训练队列的二元logistic回归构建预测概率方程,用于ROC曲线分析以比较单个及组合标志物的诊断性能。
评估AFU及AFP/AFU组合对HCC患者预后的预测价值。
利用KM plotter数据库和免疫组化染色分析AFU表达与总生存期和无病生存期的关系。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 血清标志物检测 | ELISA试剂盒 | Cusabio、eBioscience | -- |
| 免疫组化染色 | 抗AFU(FUCA2)抗体 | Bioss | bs-16192R |
| 统计分析 | SPSS统计软件(Windows 25.0版) | SPSS | -- |
| MedCalc 版本 18.2.1 | MedCalc | -- | |
| 构建列线图 | R 版本 3.0 | -- | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 患者队列 | HCC诊断标准(影像学和组织病理学)、病因分类(NBNC vs 肝炎相关)、BCLC分期、样本量(训练和验证队列) 阅读提示:Materials and methods,Study design and patients部分 |
| 血清样本采集与处理 | 采血时间(治疗前)、离心条件、储存温度 阅读提示:Materials and methods,Blood samples部分 |
| 血清生物标志物检测 | ELISA操作步骤、试剂盒供应商、双复孔 阅读提示:Materials and methods,Serum tumor marker detection部分 |
| 诊断模型评估 | cutoff值、训练/验证队列划分、logistic回归方程 阅读提示:Materials and methods,Statistical analysis部分和Results部分 |
| 免疫组化染色 | 抗体浓度、评分标准 阅读提示:Materials and methods,Immunohistochemistry部分 |