凋亡刺激蛋白p53抑制剂(iASPP)和甲基转移酶样3(METTL3)的高表达与FIGO Ib1-IIa期鳞状细胞宫颈癌的不良预后相关

Elevated Expression of Inhibitor of Apoptosis-stimulating Protein of p53 (iASPP) and Methyltransferase-like 3 (METTL3) Correlate with Poor Prognosis in FIGO Ib1-IIa Squamous Cell Cervical Cancer.

作者信息Fang Wu, Yong Zhang, Yeying Fang, Shanshan Ma, Hua Zheng, Kang Liu, Rensheng Wang
PMID32201509
期刊J Cancer
发布时间2020-02-10
DOI10.7150/jca.41029

实验完整度

临床样本免疫组化和western blot检测蛋白表达,结合临床病理资料和生存分析,但缺乏细胞或动物功能实验验证。

主要模型

112例FIGO Ib1-IIa期鳞状细胞宫颈癌患者的肿瘤组织样本 相邻非肿瘤宫颈组织样本

重点核对

iASPP和METTL3表达评分分组标准:低表达(0或1+)、高表达(2+或3+) FIGO分期(Ib1、Ib2、IIa)及盆腔淋巴结转移状态 随访时间:平均56.6个月(范围19-72个月) 生存终点:5年RFS、DMFS、PFS和OS

摘要

背景:早期宫颈癌患者的临床结局由独特的分子事件决定。因此,探索用于宫颈癌诊断和预后的新型生物标志物对于指导宫颈癌治疗至关重要。方法:纳入在中国广西医科大学第一附属医院接受根治性子宫切除术的FIGO Ib1-IIa期宫颈癌患者。通过免疫组织化学和western blot检测肿瘤标本和相邻非肿瘤宫颈组织中iASPP和METTL3的表达,并分析其与宫颈癌患者临床病理因素和预后的关系。结果:在112例患者中,Ib1期41例,Ib2期22例,IIa期49例。平均年龄45.3岁(范围25-75岁)。肿瘤大小0.3至5.0厘米(平均2.8厘米)。平均随访56.6个月(范围19-72个月)。iASPP和METTL3在宫颈癌中的表达高于正常宫颈样本(分别为p<0.001和p<0.01)。iASPP和METTL3过表达与更高的FIGO分期(分别为p=0.013和p=0.039)、盆腔淋巴结转移(分别为p=0.002和p=0.001)以及较差的5年无复发生存率、无远处转移生存率、无进展生存率和总生存率相关(分别为p=0.002、p=0.007、p=0.001、p=0.016、p=0.001、p<0.001、p=0.037和p=0.042)。高iASPP和METTL3表达是独立的预后因素(所有p<0.05)。iASPP表达与METTL3呈正相关(p=0.002)。结论:iASPP和METTL3水平在宫颈癌中升高,且两者均为早期宫颈癌患者预后不良的独立指标。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
iASPP和METTL3在早期鳞状细胞宫颈癌中的表达及其与临床病理特征和预后的关系如何?
核心机制
文中未明确说明
主要证据
112例患者肿瘤组织中iASPP和METTL3表达均升高,与FIGO分期和盆腔淋巴结转移相关,且为独立不良预后因素;iASPP与METTL3表达正相关。
研究意义
iASPP和METTL3可能作为宫颈癌预后标志物和治疗靶点,但需进一步研究其分子机制。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

患者纳入与样本收集

收集符合FIGO Ib1-IIa期鳞状细胞宫颈癌且接受根治性子宫切除术的患者肿瘤及相邻正常组织样本。

纳入2013年1月至2015年12月在广西医科大学第一附属医院治疗的112例患者,收集手术肿瘤标本和相邻正常宫颈组织。

2

蛋白表达检测

比较iASPP和METTL3在肿瘤和相邻正常组织中的蛋白表达水平。

使用免疫组织化学和western blot检测iASPP和METTL3的表达,并通过UALCAN数据库分析mRNA表达。

3

临床病理特征相关性分析

分析iASPP和METTL3表达与患者临床病理特征的关系。

根据蛋白表达将患者分为低表达和高表达组,比较组间年龄、FIGO分期、肿瘤大小、深部宫颈间质浸润、LVSI、盆腔淋巴结转移和化疗情况。

4

生存分析

评估iASPP和METTL3表达对患者预后的影响。

使用Kaplan-Meier生存曲线和对数秩检验比较高表达和低表达组的5年RFS、DMFS、PFS和OS,并通过多变量Cox回归分析确定独立预后因素。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
兔多克隆抗iASPP抗体Biossbs-0284R
兔多克隆抗METTL3抗体Biossbs-17609R
抗兔二抗Zhongshan Goldenbridge Biotechnology--
兔抗iASPP抗体Biossbs-0284R
兔抗METTL3抗体Biossbs-17609R
抗兔二抗----
FluorChem HD2成像系统----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
患者队列
纳入标准:FIGO Ib1-IIa期鳞状细胞宫颈癌,根治性子宫切除术;患者数量112例,平均年龄45.3岁,肿瘤大小范围0.3-5.0cm。
阅读提示:Materials and Methods - Patients
免疫组化
抗体克隆号及稀释度(iASPP bs-0284R 1:400;METTL3 bs-17609R 1:400),抗原修复pH 6,染色评分标准(0,1+,2+,3+)。
阅读提示:Materials and Methods - Immunohistochemistry
蛋白表达分组
低表达(0或1+)和高表达(2+或3+)的评分分组标准。
阅读提示:Materials and Methods - Immunohistochemistry
生存分析
生存终点定义(RFS, DMFS, PFS, OS),随访时间平均56.6个月,统计方法(Kaplan-Meier, log-rank, Cox回归)。
阅读提示:Materials and Methods - Definitions, Statistical analysis
治疗信息
部分患者接受新辅助化疗(31.3%),方案为紫杉醇175mg/m2+顺铂60mg/m2,每3周一次;术后同步放化疗方案。
阅读提示:Materials and Methods - Treatment regimens