患者纳入与样本收集
收集符合FIGO Ib1-IIa期鳞状细胞宫颈癌且接受根治性子宫切除术的患者肿瘤及相邻正常组织样本。
纳入2013年1月至2015年12月在广西医科大学第一附属医院治疗的112例患者,收集手术肿瘤标本和相邻正常宫颈组织。
Elevated Expression of Inhibitor of Apoptosis-stimulating Protein of p53 (iASPP) and Methyltransferase-like 3 (METTL3) Correlate with Poor Prognosis in FIGO Ib1-IIa Squamous Cell Cervical Cancer.
临床样本免疫组化和western blot检测蛋白表达,结合临床病理资料和生存分析,但缺乏细胞或动物功能实验验证。
112例FIGO Ib1-IIa期鳞状细胞宫颈癌患者的肿瘤组织样本 相邻非肿瘤宫颈组织样本
iASPP和METTL3表达评分分组标准:低表达(0或1+)、高表达(2+或3+) FIGO分期(Ib1、Ib2、IIa)及盆腔淋巴结转移状态 随访时间:平均56.6个月(范围19-72个月) 生存终点:5年RFS、DMFS、PFS和OS
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
收集符合FIGO Ib1-IIa期鳞状细胞宫颈癌且接受根治性子宫切除术的患者肿瘤及相邻正常组织样本。
纳入2013年1月至2015年12月在广西医科大学第一附属医院治疗的112例患者,收集手术肿瘤标本和相邻正常宫颈组织。
比较iASPP和METTL3在肿瘤和相邻正常组织中的蛋白表达水平。
使用免疫组织化学和western blot检测iASPP和METTL3的表达,并通过UALCAN数据库分析mRNA表达。
分析iASPP和METTL3表达与患者临床病理特征的关系。
根据蛋白表达将患者分为低表达和高表达组,比较组间年龄、FIGO分期、肿瘤大小、深部宫颈间质浸润、LVSI、盆腔淋巴结转移和化疗情况。
评估iASPP和METTL3表达对患者预后的影响。
使用Kaplan-Meier生存曲线和对数秩检验比较高表达和低表达组的5年RFS、DMFS、PFS和OS,并通过多变量Cox回归分析确定独立预后因素。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 免疫组化 | 兔多克隆抗iASPP抗体 | Bioss | bs-0284R |
| 兔多克隆抗METTL3抗体 | Bioss | bs-17609R | |
| 抗兔二抗 | Zhongshan Goldenbridge Biotechnology | -- | |
| western blot | 兔抗iASPP抗体 | Bioss | bs-0284R |
| 兔抗METTL3抗体 | Bioss | bs-17609R | |
| 抗兔二抗 | -- | -- | |
| FluorChem HD2成像系统 | -- | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 患者队列 | 纳入标准:FIGO Ib1-IIa期鳞状细胞宫颈癌,根治性子宫切除术;患者数量112例,平均年龄45.3岁,肿瘤大小范围0.3-5.0cm。 阅读提示:Materials and Methods - Patients |
| 免疫组化 | 抗体克隆号及稀释度(iASPP bs-0284R 1:400;METTL3 bs-17609R 1:400),抗原修复pH 6,染色评分标准(0,1+,2+,3+)。 阅读提示:Materials and Methods - Immunohistochemistry |
| 蛋白表达分组 | 低表达(0或1+)和高表达(2+或3+)的评分分组标准。 阅读提示:Materials and Methods - Immunohistochemistry |
| 生存分析 | 生存终点定义(RFS, DMFS, PFS, OS),随访时间平均56.6个月,统计方法(Kaplan-Meier, log-rank, Cox回归)。 阅读提示:Materials and Methods - Definitions, Statistical analysis |
| 治疗信息 | 部分患者接受新辅助化疗(31.3%),方案为紫杉醇175mg/m2+顺铂60mg/m2,每3周一次;术后同步放化疗方案。 阅读提示:Materials and Methods - Treatment regimens |