Ghrelin通过上调生长激素、生长激素促分泌素受体和胰岛素样生长因子-1的表达并促进蛋白激酶B的磷酸化来保护经缺氧/复氧处理的心肌

Ghrelin是生长激素（GH）促分泌素受体（GHSR）的内源性配体，具有多种生物学效应，包括心脏保护。本研究旨在揭示ghrelin对经缺氧/复氧（H/R）处理的心肌的积极作用及其涉及的分子机制。通过菌落聚合酶链反应（PCR）验证成功构建了慢病毒表达载体（ghrelin-pLVX-Puro）。分离原代大鼠心肌细胞，并通过免疫荧光染色进行鉴定。α-肌节肌动蛋白的红色荧光的存在表明分离成功。在ghrelin转染和H/R处理后，将原代细胞分为四组：对照组、H/R组、空载体组（空pLVX-Puro + H/R）和ghrelin组（ghrelin-pLVX-Puro + H/R）。分别通过Cell Counting Kit-8（CCK-8）和Hoechst染色评估细胞活力和凋亡。ghrelin组的细胞活力显著高于空载体组（P<0.05）。ghrelin组的凋亡率显著低于空载体组（P<0.05）。建立了离体大鼠心脏灌注模型。在ghrelin孵育和H/R处理后，将离体心肌分为四组：对照组、假手术组、H/R组和ghrelin组（ghrelin + H/R）。免疫组织化学分析表明，ghrelin增加了心肌细胞的完整性，并减少了收缩和凋亡。通过逆转录（RT）-PCR、western blot分析和免疫组织化学分析测定GH、GHSR、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化Akt（p-Akt）的mRNA和蛋白表达水平。Ghrelin在经H/R处理的心肌细胞和心肌组织中上调了GH、GHSR和IGF-1的mRNA和蛋白表达水平，并增加了p-Akt与Akt蛋白水平的比值（p-Akt/Akt）。总之，ghrelin通过上调GH、GHSR和IGF-1的表达并促进Akt的磷酸化来保护经H/R处理的心肌。这将为ghrelin治疗缺氧性心肌损伤提供有前景的见解。