肝内IL-17(+) T细胞与Foxp3(+)调节性T细胞之间的平衡在HBV相关终末期肝病中发挥重要作用

The balance between intrahepatic IL-17(+) T cells and Foxp3(+) regulatory T cells plays an important role in HBV-related end-stage liver disease.

作者信息Yinghua Niu, Hongli Liu, Donglin Yin, Ruitian Yi, Tianyan Chen, Hong'an Xue, Shulin Zhang, Shumei Lin, Yingren Zhao
PMID21851644
发布时间2011-08-19
DOI10.1186/1471-2172-12-47

实验完整度

本研究通过免疫组化检测了肝组织多种免疫细胞标志物,并进行了临床参数相关性分析,但缺乏功能验证和机制实验。

主要模型

HBV相关ACLF患者肝组织 HBV相关CLF患者肝组织 正常肝组织对照

重点核对

患者分组:ACLF组31例、CLF组26例、正常对照12例 免疫组化染色:IL-17、Foxp3、CD4、CD8、perforin 阳性细胞计数:每张切片随机选取5个高倍视野(×400) 统计分析:Mann-Whitney U检验和Spearman相关分析

摘要

背景:IL-17+ T辅助细胞和Foxp3+调节性T细胞是CD4+ T辅助细胞,其分化和功能相互调节。它们在慢性乙型肝炎患者中的频率和功能有所不同。在本研究中,我们调查了IL-17+ T细胞与Foxp3+调节性T细胞之间的平衡,并阐述了它们在慢性乙型肝炎(CHB)恶化中的作用。结果:本研究纳入了26例慢性HBV相关肝衰竭(CLF)患者、31例慢性HBV相关急性肝衰竭(ACLF)患者和12例正常对照。通过免疫组化检测肝组织中IL-17、Foxp3、CD4、CD8和穿孔素的表达,以评估肝浸润淋巴细胞。ACLF组肝内IL-17+ T细胞在肝炎症细胞中的频率及其在总CD4+ T细胞群中的比例显着增加,而Foxp3+ T细胞的频率及其在总CD4+ T细胞群中的比例在两个HBV感染组中没有显着差异。此外,ACLF组的IL-17+/Foxp3+比值显着高于CLF组。与CLF患者相比,ACLF患者肝内CD4+ T细胞显着增加。结论:我们的研究结果表明,肝内IL-17+ T细胞在慢性HBV的发展中发挥重要作用,肝内IL-17+与Foxp3+ T细胞之间的失衡可能导致疾病进展,但机制有待进一步探讨。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
肝内IL-17+ T细胞和Foxp3+调节性T细胞的频率及比值在HBV相关肝功能衰竭进展中是否发生变化,以及它们与临床参数的相关性。
核心机制
肝内IL-17+ T细胞增加与Foxp3+ T细胞相对不足导致的IL-17+/Foxp3+比值失衡可能促进HBV相关ACLF的进展。
主要证据
免疫组化显示ACLF组肝内IL-17+ T细胞频率和IL-17+/Foxp3+比值显著高于CLF组,且IL-17+ T细胞频率与总胆红素、MELD评分正相关。
研究意义
该研究提示肝内IL-17+ T细胞可能在慢性乙型肝炎进展中发挥重要作用,IL-17+/Foxp3+失衡可能作为疾病进展的标志,但机制需进一步探索。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

患者入组与临床数据收集

比较HBV相关ACLF、CLF和正常对照的临床特征。

招募了57例终末期肝病患者和12例正常对照,记录临床参数并计算MELD评分。

2

免疫组化检测肝内免疫细胞标志物

检测肝组织中IL-17、Foxp3、CD4、CD8和穿孔素的表达水平。

对石蜡包埋的肝组织切片进行免疫组化染色,计数阳性细胞占肝炎症细胞的比例。

3

统计分析频率与临床参数的相关性

评估IL-17+和Foxp3+ T细胞频率与临床严重程度指标的相关性。

使用Spearman等级相关分析IL-17+ T细胞频率、IL-17+/Foxp3+比值与Tbil、CHOL、MELD评分等参数的相关性。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

验证样本或模型特征

产品清单

实验环节名称品牌货号
抗人Foxp3抗体eBiosciences--
抗人IL-17抗体Beijing Bioss Biotech--
抗人CD4抗体Zymed--
抗人CD8抗体Zymed--
抗穿孔素抗体Zymed--
无生物素二抗Zhongshan Goldenbridge Biotech--
辣根过氧化物酶Zhongshan Goldenbridge Biotech--
SPSS 16.0统计软件SPSS Inc.--

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
样本收集与病理诊断
患者纳入标准:HBV相关ACLF和CLF的诊断标准;排除标准
阅读提示:Methods 'Subjects'部分
免疫组化染色
一抗浓度(稀释比)、抗原修复条件、抗体孵育温度和时间、DAB显色时间
阅读提示:Table 3 和 Methods 'Immunohistochemical staining'部分
阳性细胞计数
计数视野数(5个高倍视野)、细胞计数标准
阅读提示:Methods 'Data collection of Immunohistochemical staining'部分
统计分析
非参数检验方法、相关分析方法、显著性水平
阅读提示:Methods 'Statistical analysis'部分