缺氧诱导因子-1α和MAPK共同调控缺氧刺激下肝星状细胞的活化

背景：肝星状细胞（HSC）在肝纤维化的发病机制中起关键作用。在肝损伤过程中，局部微环境缺氧是不可避免的。Hif-1α是诱导细胞对缺氧产生适应性反应的关键转录调控因子。最近有报道称MAPK参与调控Hif-1α的活性。目的：探讨Hif-1α是否调控缺氧条件下HSC的活化，以及MAPK是否影响Hif-1α调控的信号级联，从而为预防肝纤维化提供新靶点。方法：采用western blot和免疫组化检测日本血吸虫感染的BALB/c小鼠肝脏中Hif-1α的表达。大鼠HSC细胞系HSC-T6在1%氧气中培养。通过western blot或免疫细胞化学检测HSC活化，包括F-肌动蛋白重组、波形蛋白和α-SMA的增加。用特异性siRNA转染细胞敲低Hif-1α，用western blot、实时PCR和ELISA检测活化标志物的表达、促纤维化细胞因子的转录和I型胶原的分泌。用PD98059（一种特异性MEK1药理学抑制剂）预处理的HSC-T6细胞裂解物，通过western blot和免疫沉淀检测Hif-1α的泛素化和核转位。结果与结论：日本血吸虫感染小鼠肝组织中Hif-1α明显升高。1% O2诱导HSC-T6细胞F-肌动蛋白重组，Hif-1α、波形蛋白和α-SMA增加。Hif-1α敲低抑制缺氧条件下HSC-T6细胞的活化、IL-6、TGF-β和CTGF的转录以及I型胶原的分泌。抑制MAPK磷酸化增强了Hif-1α的泛素化，并抑制了Hif-1α向细胞核的转位。结论：Hif-1α和MAPK参与缺氧条件下HSC的活化。