M2型小胶质细胞来源的外泌体通过调控miR-124-3p/NCOA4介导的铁死亡减轻氧糖剥夺/复氧诱导的HT22细胞损伤

背景：尽管已有报道称M2小胶质细胞外泌体携带的miRNA可保护神经元免受缺血再灌注脑损伤，但其作用机制仍知之甚少。本研究旨在探讨M2型小胶质细胞来源的外泌体（M2-exosomes）通过miRNA信号通路减轻氧糖剥夺/复氧（OGD/R）诱导的HT22细胞毒性的机制。方法：通过M2极化诱导BV2小胶质细胞。然后，通过透射电子显微镜和特异性生物标志物检测鉴定M2-exosomes，并与HT22细胞共培养。使用Cell Counting Kit-8（CCK-8）试剂盒评估细胞增殖。使用二氯荧光素荧光和生化测定法测定细胞内活性氧（ROS）、Fe2+、谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）的浓度。使用qRT-PCR测定miR-124-3p水平，并通过Western blotting检测蛋白表达。结果：OGD/R抑制了小鼠HT22细胞的增殖，并诱导Fe2+、ROS和MDA积累以及GSH减少，提示HT22细胞发生铁死亡。M2-exosomes可改善OGD/R引起的上述指标变化，但外泌体抑制剂GW4869可恢复这些变化。过表达miR-124-3p的外泌体（mimic-exo）和敲低miR-124-3p的外泌体（inhibitor-exo）分别促进和抑制HT22细胞的增殖和铁死亡相关指标。此外，mimic-exo和inhibitor-exo分别抑制和增强HT22细胞中NCOA4的表达。NCOA4过表达逆转了miR-124-3p mimic-exo在OGD/R条件下的保护作用。miR-124-3p靶向并调控NCOA4。结论：M2-exosome通过将miR-124-3p和NCOA4转移至HT22细胞，保护HT22细胞免受OGD/R诱导的铁死亡损伤，其中NCOA4是miR-124-3p的靶基因。