SETD8与MZF1协同通过升高WNT5A水平参与糖尿病肾病高血糖诱导的内皮炎症

目的：糖尿病肾病（DN）被认为是糖尿病的主要血管并发症，直接影响糖尿病患者的预后。据报道，炎症因子参与DN的进展。Wingless-type家族成员5（WNT5A）、髓系锌指蛋白1（MZF1）和赖氨酸甲基转移酶8（SETD8）也被报道可升高炎症因子水平并激活核因子κB（NF-κB）通路诱导内皮功能障碍。在本研究中，假设MZF1与SETD8结合调节WNT5A转录，从而导致DN中高血糖诱导的肾小球内皮炎症。方法：本研究连续招募了25名确诊的DN患者（2型糖尿病）和25名对照参与者（肾功能正常的非糖尿病肾癌患者，I-II期）。此外，构建了DN大鼠和细胞模型。采用免疫组织化学、Western blot和定量聚合酶链反应（qPCR）检测蛋白和信使RNA（mRNA）水平。在人肾小球内皮细胞（HGECs）中进行免疫共沉淀（CoIP）和免疫荧光。采用染色质免疫沉淀实验和双荧光素酶实验测定转录活性。结果：本研究结果表明，DN患者和大鼠中WNT5A表达、p65磷酸化（p-p65）和炎症因子的水平均升高。体外，在高糖HGECs中，p-p65和炎症因子水平随WNT5A表达的增加而升高。此外，高糖增加MZF1表达并降低SETD8表达。在高糖刺激下，MZF1和SETD8相互抑制，但协同调节WNT5A表达，从而影响p-p65和内皮炎症因子水平。MZF1过表达和SETD8沉默诱导内皮p-p65和炎症因子水平，这可以被si-WNT5A逆转。机制研究表明，MZF1、SETD8及其下游靶标组蛋白H4赖氨酸20甲基化（H4K20me1）均占据WNT5A启动子区域。sh-SETD8扩大了MZF1在WNT5A启动子上的富集。我们的体内研究证明，SETD8过表达抑制了DN大鼠中WNT5A、p-p65表达和炎症因子的水平。结论：在HGECs中，MZF1与SETD8连接调节WNT5A表达，从而升高DN患者和大鼠肾小球内皮中高血糖介导的炎症因子水平。试验注册：ChiCTR，ChiCTR2000029425。2020年1月31日，http://www.chictr.org.cn/showproj.aspx?proj=48548。