建立AMIGO2特异性抗体改善结直肠癌患者肝转移的免疫组织化学评估和临床结局

背景：人两性蛋白诱导基因和开放阅读框（AMIGO）被鉴定为一种I型跨膜蛋白的新型细胞粘附分子。AMIGO2是AMIGO家族（AMIGO1、2和3）的三个成员之一，它们之间的氨基酸序列相似性约为40%。我们先前已表明AMIGO2作为肝转移的驱动因子。使用商业化的抗AMIGO2小鼠单克隆抗体克隆sc-373699（sc mAb）对结直肠癌（CRC）中AMIGO2表达进行的免疫组织化学分析与肝转移和不良预后相关。然而，发现sc mAb与AMIGO家族中的所有三种分子发生交叉反应。方法：我们生成了针对人AMIGO2的大鼠单克隆抗体克隆rTNK1A0012（rTNK mAb）。使用rTNK mAb，使用先前报道的用sc mAb检测的相同CRC组织样本，重新评估AMIGO2表达与肝转移/临床结局之间的关联。结果：Western blot分析显示，rTNK mAb被鉴定为对AMIGO2蛋白具有特异性，并且不与AMIGO1和AMIGO3发生交叉反应。rTNK mAb和sc mAb均显示较高的AMIGO2表达，这与高频率的肝转移相关（分别为65.3%和47.5%），而多变量分析显示，AMIGO2表达是肝转移的独立预后因素（p = 7.930E-10和p = 1.707E-5）。Kaplan-Meier分析显示，rTNK mAb（p = 0.004），而非sc mAb（p = 0.107），可预测AMIGO2高表达患者较差的总生存期。AMIGO2表达与较差疾病特异性生存期之间的关系显示，rTNK mAb（p = 0.00004）的显著性水平高于sc mAb（p = 0.001）。结论：这些结果表明，开发的rTNK1A0012 mAb是一种通过免疫组织化学特异性识别AMIGO2的抗体，并且可以成为检测高表达AMIGO2的CRC患者肝转移和较差预后的更可靠和适用的方法。