抗炎分子AIM/CD5L在雄性小鼠肠道缺血/再灌注损伤中的作用

背景：急性肠道缺血的解除导致再灌注损伤，释放损伤相关分子模式（DAMPs）并造成组织损伤。一种关键的DAMP，细胞外冷诱导RNA结合蛋白（eCIRP），加剧再灌注损伤中的炎症，导致器官衰竭和死亡。巨噬细胞凋亡抑制因子（AIM或CD5L）是一种由巨噬细胞分泌的糖蛋白，可影响免疫细胞的活性。我们旨在研究AIM在缺血/再灌注（I/R）中的表达，并阐明其在巨噬细胞和肠上皮细胞中的抗炎作用。方法：雄性小鼠接受肠系膜上动脉闭塞60分钟，再灌注4小时后收集样本。通过qPCR、Western blot和ELISA评估血液和组织中AIM的表达。用重组小鼠（rm）CIRP（记为eCIRP）刺激雄性小鼠的原代腹腔巨噬细胞、IEC-6肠上皮细胞和RAW 264.7巨噬细胞，并用rmAIM处理。通过ELISA和qPCR评估细胞因子水平。使用Agilent Seahorse XF Pro分析仪测量巨噬细胞的代谢功能。通过计算机模拟方法阐明AIM、eCIRP与eCIRP受体Toll样受体4（TLR4）和髓样细胞触发受体-1（TREM-1）之间的相互作用。结果：与假手术小鼠相比，肠道I/R小鼠肺部AIM mRNA表达下降55.9%（p=0.018），蛋白水平下降26.9%（p=0.032）。肠道I/R小鼠血浆AIM浓度下降22.0%（p=0.0362）。eCIRP处理增加了巨噬细胞和肠上皮细胞促炎细胞因子的产生。这种增加被rmAIM共处理显著减弱。与单独eCIRP刺激相比，巨噬细胞经rmAIM处理后基础耗氧率增加66.7%，ATP产生增加70.3%（p<0.0001）。计算模型预测AIM与eCIRP受体TLR4和TREM-1之间存在强相互作用，并显示AIM的存在改变了eCIRP与这些受体的结合。结论：在雄性小鼠中，肠道I/R降低了肺部AIM蛋白水平和mRNA表达以及血浆AIM浓度。AIM减少eCIRP诱导的巨噬细胞促炎细胞因子产生，可能通过抑制eCIRP与TLR4和TREM-1的结合。这些发现表明AIM是雄性肠道I/R一个有前景的治疗候选药物。