卵巢子宫内膜瘤和子宫腺肌症中的生殖道微生物失调：多位点16S rRNA谱分析及关键细菌种类对人子宫内膜基质细胞的功能影响

目的：表征卵巢巧克力囊肿（CC）和子宫腺肌症（AM）患者与对照组（NC）相比的生殖道微生物群，并研究代表性差异细菌对人子宫内膜基质细胞（T-HESC）的体外影响。方法：使用16S rRNA测序分析了20例CC、20例AM和20例NC患者的宫颈管、后穹窿、腹水和子宫内膜的微生物群谱。生物信息学分析包括多样性评估和差异丰度检验，采用稳健共识方法结合LEfSe、ALDEx2和ANCOM-BC以减轻成分偏差。来自差异属的代表性细菌（Lactobacillus sp.（NC）、Enterococcus sp.（AM）和来自肠杆菌科的一个菌株（CC））与T-HESC共培养。评估细胞活力（CCK-8）和转录组变化（RNA-seq，GO/KEGG分析）。通过qRT-PCR和ELISA验证关键DEGs。结果：与NC相比，在CC和AM组的不同部位观察到微生物组成和多样性的显著改变。我们的稳健差异丰度分析确定了部位特异性生物标志物，包括NC子宫内膜中乳杆菌科的富集和后穹窿AM组中肠球菌属的富集。RNA-seq揭示了不同的转录组重编程：CC共培养改变了如ADH1B、MYOM1、PTGFR、ACLY等基因，富集了如错配修复等通路；AM共培养影响了CEBPB、SERPINE1、S100A1、CKS1B，富集了MAPK信号通路和癌症通路。验证在mRNA和蛋白质水平上证实了这些变化。结论：子宫内膜异位症（CC和AM）与生殖道微生物群的不同改变相关。与AM和CC相关的特定细菌在体外损害子宫内膜基质细胞活力并诱导独特的转录组变化，表明微生物失调通过影响子宫内膜细胞功能参与了子宫内膜异位症的病理生理。