S659位点的O-GlcNAc修饰增强SARS-CoV-2刺突蛋白稳定性及假病毒包装效率

严重急性呼吸综合征冠状病毒2的刺突蛋白在病毒进入和发病机制中发挥着至关重要的作用，使其成为治疗策略的重要靶点。在本研究中，我们探讨了S蛋白与O-GlcNAc转移酶之间的相互作用，通过免疫沉淀和谷胱甘肽S-转移酶-pulldown实验揭示了这些蛋白质之间的物理关联。我们的结果表明，S蛋白上的S659是O-GlcNAc修饰的主要位点，这一点通过离子迁移质谱和突变研究得以证实。值得注意的是，S659A突变显著降低了S蛋白的O-GlcNAc修饰水平，导致泛素化增加并随后加速S蛋白的降解。放线菌酮脉冲追踪实验进一步证实，与S659A突变体相比，野生型S蛋白具有更高的稳定性。尽管存在这些稳定性变化，S659A突变并未损害S蛋白与其受体ACE2的结合亲和力。然而，我们发现S659A突变显著降低了SARS-CoV-2假病毒的包装效率。总的来说，我们的研究结果强调了S659位点的O-GlcNAc修饰在调节S蛋白稳定性和病毒颗粒组装中的关键作用，并强调了其作为针对SARS-CoV-2治疗干预靶点的潜力。