携带截短轻链转基因的鸡表达单域重链抗体

重链抗体（H chain–only Igs）天然存在于骆驼科动物和鲨鱼中。由于这些抗体缺乏轻链，其抗原结合结构域大小仅为传统抗体的一半，使得这类Ig能够以新颖方式结合靶标。因此，重链抗体单域抗体（sdAb）结构有可能增加活跃体液免疫系统的库容和功能范围。大多数脊椎动物使用标准的异二聚体（重链和轻链都有）结构，不产生sdAb形式的免疫球蛋白。为了探究其他动物是否能够支持sdAb的发育和功能，设计了转基因鸡（Gallus gallus），通过省略轻链V区而仅保留LC区作为细胞分泌抗体的分子伴侣，来产生重链抗体。这些鸡在外周血单个核细胞（PBMC）中产生30-50%的正常B细胞群，并易于表达鸡序列的sdAb。有趣的是，重链含有自发的CH1缺失。尽管没有发生向IgY或IgA的同种型转换，但IgM库是多样的，用多种蛋白质免疫原免疫可迅速产生高且特异的血清滴度。通过单B细胞筛选可有效回收高亲和力的单克隆抗体。在体外功能试验中，针对SARS-CoV-2免疫的鸡产生的sdAb也能强烈中和并阻止病毒复制。这些数据表明，截短的轻链设计成功支持了鸡体内sdAb的发育和表达。