疫苗株筛选与病毒制备
获得高繁殖力且遗传稳定的Delta变异株灭活疫苗候选株。
从输入病例样品中筛选Delta变异株，经纯化和连续传代评估遗传稳定性，确定最佳接种MOI和收获时间，然后用β-丙内酯灭活病毒，通过电镜和Western blot确认病毒颗粒和结构蛋白。
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Delta（B.1.617.2）灭活疫苗候选株在恒河猴中诱导针对SARS-CoV-2及其流行变异株的中和抗体
Delta (B.1.617.2) inactivated vaccine candidate elicited neutralizing antibodies to SARS-CoV-2 and circulating variants in rhesus macaques.
实验完整度
高文献包含体外病毒灭活验证、小鼠/大鼠免疫原性实验、恒河猴攻毒保护实验以及多种毒性实验，涵盖体外和体内多个证据层级，并包含功能验证。
主要模型
Vero细胞 BALB/c小鼠 SD大鼠 恒河猴 食蟹猴 豚鼠
重点核对
疫苗株为Delta变异株（B.1.617.2），分离自2021年舟山输入病例样品 免疫程序：恒河猴为第0天和第28天肌内注射两剂，剂量分别为10 μg和20 μg 攻毒：第二次免疫后21天，以1×10^5 TCID50的Delta变异株经气管途径攻毒 中和抗体检测针对原型株、Delta、Omicron BA.2.3、BA.5.2.1和XBB.1.5，采用微量中和试验 肺部病毒载量通过实时PCR检测，病理分析评估肺部损伤
实验结论
提炼研究问题、关键发现与证据，快速把握文章的核心贡献。
- 研究问题
- 评估基于Delta变异株的灭活疫苗在恒河猴模型中的免疫原性、保护效力和安全性。
- 核心机制
- 灭活疫苗诱导产生广谱中和抗体，针对多种SARS-CoV-2变异株（包括Omicron亚型）具有交叉中和活性，从而提供保护。
- 主要证据
- 恒河猴免疫后血清中和抗体检测显示对多种变异株有中和活性；攻毒后疫苗组咽喉拭子病毒检测阴性，高剂量组肺部未检出病毒RNA，且肺部病理损伤较对照组轻。
- 研究意义
- 该Delta灭活疫苗具有良好的免疫原性和安全性，可作为应对未来疫情爆发的储备疫苗，并为进一步研究序贯免疫策略提供基础。
研究路径
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
小鼠和大鼠免疫原性实验
评估不同剂量和免疫程序下疫苗的免疫原性及交叉中和抗体水平。
BALB/c小鼠和SD大鼠分别按D0/D14或D0/D28免疫程序接种不同剂量（5、10、20 μg）疫苗，检测血清特异性IgG抗体和针对原型株及变异株的中和抗体。
恒河猴攻毒保护实验
评估Delta灭活疫苗对恒河猴感染Delta变异株的保护效果。
恒河猴随机分为三组，于第0天和第28天免疫两次，第二次免疫后21天以Delta变异株经气管攻毒，观察临床体征、病毒载量和肺部病理变化。
毒性实验
评估疫苗的急性毒性、重复给药毒性和致敏性。
在SD大鼠中进行单次给药毒性实验，在食蟹猴中进行重复给药毒性实验，在豚鼠中进行全身主动过敏反应实验。
研究方法
按研究目的归类文中使用的方法，便于定位所需技术。
产品清单
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 病毒灭活 | β-丙内酯 | -- | -- |
| 细胞培养 | Vero细胞 | -- | -- |
| 免疫检测 | SARS-CoV-2 S特异性IgG抗体 | -- | -- |
| 中和抗体 | -- | -- |
关键环节
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 疫苗制备 | 疫苗株为Delta变异株（B.1.617.2），来源及传代信息；病毒接种MOI和收获时间；灭活剂β-丙内酯的比例和处理条件；灭活验证方法 阅读提示：见Methods部分“Vaccine virus stability and inactivation verification”及图S2 |
| 动物免疫 | 动物品系、性别、数量和体重；免疫剂量、佐剂种类和浓度；免疫程序（D0/D14或D0/D28）；采血时间点 阅读提示：见Methods部分“Immunogenicity in mice and rats”及图S3 |
| 恒河猴攻毒保护实验 | 恒河猴分组、剂量（10 μg和20 μg）、免疫时间（D0/D28）；攻毒病毒株、剂量（1×10^5 TCID50）、攻毒途径（气管）、攻毒时间（第二次免疫后21天）；检测指标和方法（咽喉拭子病毒载量、肺部病毒RNA、病理） 阅读提示：见Methods部分“Rhesus macaque challenge”及图1E-K |
| 安全性评估 | 毒性实验的动物模型、剂量、给药途径、给药方案；过敏反应的致敏和刺激剂量及时间 阅读提示：见Methods部分“Toxicity”和“Allergenicity” |