男男性行为者中抗正痘病毒中和抗体水平出乎意料地高于普通成年人群

Unexpectedly higher levels of anti-orthopoxvirus neutralizing antibodies are observed among gay men than general adult population.

作者信息Yanmeng Feng, Yifan Zhang, Shengya Liu, Meng Guo, Haojie Huang, Cuiyuan Guo, Wanhai Wang, Wenhong Zhang, Heng Tang, Yanmin Wan
PMID37189197
期刊BMC Med
发布时间2023-05-16
DOI10.1186/s12916-023-02872-0

实验完整度

中

研究包含两个人群队列的横断面样本,使用ELISA和PRNT检测抗体,并进行了相关性和亚组分析,但缺乏体内功能验证或机制实验。

主要模型

MSM队列(n=326) 普通成年人群队列(n=295)

重点核对

队列分为按年龄≤41岁和>41岁(出生前后于1981年) PRNT检测血清稀释度1:30 ELISA检测血浆稀释度1:50 中和抗体阳性阈值PRNT50≥30 排除慢性疾病和活动性感染

摘要

背景:当前猴痘暴发中的确诊病例主要出现在男男性行为者(MSM)网络中。预先存在的抗体可能深刻影响猴痘病毒(MPXV)的传播,然而目前男男性行为者中抗MPXV抗体的流行情况尚未明确。方法:本研究纳入了一组男男性行为者(n=326)和一组普通成年人群(n=295)。检测了针对MPXV/痘苗病毒的结合抗体反应和针对痘苗病毒(天坛株)的中和抗体反应。比较了这两个队列的抗体反应,以及1981年前后出生(中国停止天花疫苗接种的年份)个体的反应。最后,分别分析了抗MPXV抗体反应与抗痘苗抗体反应之间的相关性,以及预先存在的抗正痘病毒抗体反应与MSM队列中诊断的性传播感染(STIs)之间的关联。结果:我们的数据显示,在1981年前后出生的个体中均可检测到针对MPXV H3、A29、A35、E8、B6、M1蛋白和痘苗全病毒裂解物的结合抗体,其中普通人群队列中1981年前出生的个体抗痘苗结合抗体的阳性率显著更高。此外,我们意外发现,在MSM队列中1981年后出生的个体中,针对MPXV H3、A29、A35、E8和M1蛋白的结合抗体阳性率显著低于普通人群队列中的同龄个体,但抗MPXV B6和抗痘苗中和抗体的阳性率在这些个体中显著更高。另外,我们证明了在普通人群队列1981年前出生的个体中,抗MPXV抗体反应的阳性和阴性率与抗痘苗抗体反应相关,但在两个队列的1981年后出生的个体中未观察到显著关联。在MSM队列中,有无诊断STIs的个体之间结合抗体和中和抗体的阳性率相当。结论:在MSM队列和普通人群队列中均可轻易检测到抗MPXV和抗痘苗抗体。与普通人群队列中的同龄个体相比,在MSM队列中未接种天花疫苗的个体中观察到更高水平的抗痘苗中和抗体反应。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
MSM队列与普通人群队列中预先存在的抗正痘病毒抗体反应有何差异?
核心机制
未明确说明,但推测可能由共生菌或病原体诱导的交叉反应抗体所致
主要证据
在MSM队列中,1981年后出生的个体(≤41岁)相比普通人群同龄个体,抗痘苗中和抗体反应显著更高,且与STIs无关
研究意义
研究表明MPXV的基本再生数(R0)可能被低估,因为未考虑预先存在的抗体反应

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

队列招募与样本采集

比较MSM队列和普通人群队列的抗正痘病毒抗体水平

在湖北疾控中心招募MSM队列(n=326)和普通成年人队列(n=295),采集外周血分离血浆,-80°C保存。

2

结合抗体检测

检测针对MPXV和痘苗病毒蛋白的结合IgG抗体

使用自建ELISA检测血浆中针对MPXV H3、A29、A35、E8、B6、M1蛋白和痘苗全病毒裂解物的结合IgG抗体。

3

中和抗体检测

检测针对痘苗病毒(天坛株)的中和抗体反应

使用蚀斑减少中和试验(PRNT)检测中和抗体,血清稀释1:30,与病毒孵育后感染Vero细胞,4天后计数蚀斑。

4

统计分析

比较组间差异并分析相关性

使用非参数t检验、单因素方差分析、卡方检验和Pearson相关性分析。P≤0.05为显著。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
高结合力96孔酶标板Corning9018
痘苗病毒A27蛋白Sino Biological40897-V07E
痘苗病毒A33蛋白Sino Biological40896-V07E
痘苗病毒H3蛋白CusabioCSB-EP324943VAA1
辣根过氧化物酶标记的山羊抗人IgG抗体Abcamab6759
TMB底物MESGENMG882
酶标仪Biotek800TS
BCA试剂盒VazymeE112-01
杜氏改良Eagle培养基----
痘苗病毒(天坛株)----
Vero细胞----
甲基纤维素----
结晶紫----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
队列招募
排除标准包括慢性疾病和活动性感染,具体疾病列表;年龄分组≤41和>41
阅读提示:Methods: Study populations and sample collection, Table 1
结合抗体检测
血浆稀释比1:50;蛋白包被浓度1 µg/ml;cut-off值0.13;洗板次数等
阅读提示:Methods: Detection of binding IgG antibodies against MPXV H3, A29, A35, B6, M1, E8 proteins and vaccinia virus A33, A27, H3 proteins; Results: Comparisons of binding antibody responses...
中和抗体检测
血清稀释度1:30;病毒量20 pfu/100 μL;孵育时间;Vero细胞用量;重复数;中和阳性阈值PRNT50≥30
阅读提示:Methods: Plaque Reduction Neutralization Test (PRNT); Results: Significantly higher levels of neutralizing antibody responses...
统计分析
统计软件版本;正态性检验;非参数t检验;卡方检验;Pearson相关;显著性水平P≤0.05
阅读提示:Methods: Statistical analysis