靶向部分类型和蛋白冠形成对癌细胞摄取Fn14靶向纳米颗粒的影响

TWEAK受体Fn14是癌症纳米治疗药物主动靶向多种实体瘤类型（包括转移性乳腺癌和原发性脑癌）的有前景的候选靶点。治疗性纳米颗粒（NPs）的靶向已通过多种靶向部分实现，包括单克隆抗体及其相关片段、肽和小分子。在本研究中，我们研究了全长Fn14特异性单克隆抗体ITEM4或ITEM4-Fab片段作为靶向部分，以指导临床制剂的开发。我们配制了具有不同靶向部分密度的纳米颗粒，同时保持降低的非特异性粘附性和受体靶向（DART）特性。为了模拟静脉输注后纳米颗粒所经历的条件，我们研究了血清暴露对靶向部分类型和表面密度的影响。为了进一步评估癌细胞水平上的性能，我们使用共聚焦显微镜、成像流式细胞术和全内反射荧光显微镜进行了实验，评估了几种癌细胞系中细胞摄取和胞内运输的差异。我们观察到Fn14靶向纳米颗粒在Fn14高表达的癌细胞中相比Fn14低表达的癌细胞表现出增强的细胞摄取，并且在两种细胞系中，摄取水平均高于对照非靶向纳米颗粒。我们发现血清暴露增加了Fn14靶向纳米颗粒的特异性，同时降低了总纳米颗粒摄取。重要的是，当靶向部分为抗体片段（单克隆抗体的Fab区）时，血清暴露导致的癌细胞摄取减少随时间更大，与全长单克隆抗体靶向部分相比。最后，我们发现全长单克隆抗体靶向的纳米颗粒通过网格蛋白介导的内吞作用进入癌细胞，并通过内溶酶体途径运输。综上，这些结果支持了使用全长Fn14单克隆抗体作为靶向部分开发DART癌症纳米治疗剂的途径。