基于细胞的“细胞因子释放综合征”模型支持嵌合抗原受体T细胞中CD40L和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子敲除作为缓解策略

虽然嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法在血液系统恶性肿瘤患者中显示出有希望的结果，但它也与不良副作用相关，如细胞因子释放综合征（CRS）。CRS是由CAR T细胞介导的单核细胞活化触发的，这些细胞通过CD40L–CD40R轴或通过摄取GM-CSF被刺激分泌促炎细胞因子。小鼠模型已被用于模拟CRS，但使用它们需要大量劳动，并且不适合筛选方法。为了克服这一挑战，我们建立了两种简单的基于细胞的CRS体外模型，涉及将白血病B细胞与CD19靶向的CAR T细胞和来自同一供体的原代单核细胞共培养。在遇到抗原时，CAR T细胞上调CD40L并释放GM-CSF，进而刺激单核细胞分泌IL-6。为了支持这些模型，我们证明了使用CRISPR-Cas技术中和抗体或基因破坏CAR T细胞中的CD40L和/或CSF2位点可显著减少旁观者单核细胞分泌的IL-6，而不影响工程淋巴细胞在体外的溶细胞活性。总的来说，我们的基于细胞的模型能够在体外重现CRS，使我们能够验证基于抗体或基因组编辑的缓解策略。