两种不同单克隆抗体识别的MERS-CoV刺突蛋白受体结合域表面两个新型线性表位的精确定位

Precise location of two novel linear epitopes on the receptor-binding domain surface of MERS-CoV spike protein recognized by two different monoclonal antibodies.

作者信息Pan Wang, Peiyang Ding, Qiang Wei, Hongliang Liu, Yunchao Liu, Qingmei Li, Yunrui Xing, Ge Li, Enmin Zhou, Gaiping Zhang
PMID34871658
发布时间2022-01-15
DOI10.1016/j.ijbiomac.2021.11.192

实验完整度

文献包含抗体制备、ELISA、Western blot、IFA、假病毒中和试验、表位作图及丙氨酸扫描等实验,验证了表位结合及关键残基,但缺乏体内功能验证。

摘要

中东呼吸综合征冠状病毒(MERS-CoV)是一种可导致严重人类呼吸道疾病的冠状病毒,病死率接近36%。在本研究中,我们报道了针对MERS-CoV刺突蛋白受体结合域(RBD)的若干单克隆抗体的制备、表征和表位作图。选择了两种可与线性化RBD反应的单克隆抗体(4C7和6E8)用于后续RBD mAb结合表位的鉴定。通过斑点杂交和ELISA,将两个不同的新型线性表位423FTCSQIS429和546SPLEGGGWL554精确定位于RBD的最外表面。多序列比对分析表明,这两个肽段高度保守。丙氨酸扫描突变表明,残基423F、428I和429S是线性表位423FTCSQIS429的关键残基,而残基548L、550G、553W和554L是表位546SPLEGGGWL554的关键残基。这些发现可能有助于进一步理解RBD蛋白的功能以及后续诊断和检测方法的开发。