黏附G蛋白偶联受体GPR133（ADGRD1）的分子内切割和解离对经典信号传导的功能影响。

GPR133（ADGRD1）是一种黏附G蛋白偶联受体（GPCR），其经典信号传导激活GαS介导的胞质cAMP生成，已被证明对胶质母细胞瘤（GBM）这种脑恶性肿瘤的生长是必需的。GPR133的胞外N末端被认为在GPCR自蛋白水解诱导域进行自蛋白水解切割，产生N末端片段（NTF）和C末端片段（CTF）。然而，这种切割在受体激活中的作用仍不清楚。在这里，我们使用亚细胞分离和免疫沉淀方法表明，WT GPR133受体在蛋白质合成后不久被切割，并在患者来源的GBM培养细胞和HEK293T细胞中产生比不可切割的点突变体GPR133（H543R）显著更多的经典信号。切割后，产生的NTF和CTF保持非共价结合，直到受体被运输到质膜，我们在那里证明了NTF–CTF解离发生。使用GPR133的CTF与凝血酶激活的人蛋白酶激活受体1的N末端的融合体作为可控的代理系统，以测试分子内切割和解离的影响，我们还表明凝血酶诱导的切割和人蛋白酶激活受体1 NTF的脱落增加了细胞内cAMP水平。这些结果支持一个模型，其中NTF在质膜处与CTF的解离促进GPR133激活和下游信号传导。这些发现加深了我们对GPR133分子生命周期和作用机制的理解，并为靶向GPR133治疗GBM提供了关键见解。