PRP4激酶结构域缺失消除人结直肠癌细胞的耐药性和上皮间质转化

我们研究了前体mRNA加工因子4B（PRP4）激酶结构域在介导耐药性中的作用。用姜黄素处理HCT116细胞，通过流式细胞术和活性氧（ROS）的产生评估细胞凋亡。然后，用PRP4或前体mRNA加工剪接因子8（PRP8）转染细胞，并在体外和体内分析耐药性。此外，我们使用Gateway™技术删除了PRP4中的激酶结构域。姜黄素通过产生ROS和降低存活信号的激活来诱导细胞死亡，但PRP4过表达逆转了姜黄素诱导的氧化应激和细胞凋亡。PRP8未能逆转姜黄素诱导的HCT116结肠癌细胞系凋亡。在异种移植小鼠模型实验中，姜黄素有效减小了肿瘤大小，而PRP4赋予了对姜黄素的耐药性，这从肿瘤大小增加可以看出，而PRP8未能调节姜黄素的作用。PRP4过表达改变了细胞形态，重排了肌动蛋白细胞骨架，触发了上皮间质转化（EMT），并降低了HCT116细胞的侵袭性。在过表达PRP4的HCT116细胞中观察到E-钙黏蛋白（EMT的标志）的缺失。此外，我们观察到PRP4的EMT诱导潜力在其激酶结构域缺失后被中止。总的来说，我们的研究表明，PRP4激酶结构域通过诱导EMT促进对姜黄素的耐药性。进一步评估PRP4诱导的细胞死亡抑制以及PRP4激酶结构域与各种其他蛋白质的相互作用，可能有助于开发克服结肠癌患者耐药性的新方法。