检测视网膜母细胞瘤中MYCN扩增的参数和阈值定义

视网膜母细胞瘤是一种恶性儿童肿瘤，其中MYCN扩增定义了一组预后较差的肿瘤亚型。FISH（荧光原位杂交）是一种快速可靠的方法，用于测量各种肿瘤中的基因拷贝数，但尚未在视网膜母细胞瘤中进行系统评估。在本研究中，我们通过使用一个特征明确的44例临床视网膜母细胞瘤样本系列，以系统、无偏倚的方法定义了FISH检测MYCN扩增的标准。我们（i）通过全面的文献综述确定了潜在的测量指标和参数，（ii）分析了已知MYCN扩增的回顾性队列样本，（iii）确定了能够可靠检测扩增肿瘤的统计测量值和截断值，以及（iv）将这些标准应用于前瞻性队列。我们证明，如果至少计数50个细胞，每细胞MYCN平均基因拷贝数（AVGCN）、MYCN/CEN2比值和MYCN-CEN2差异在扩增样本中显示出最低的统计方差。这三个参数和截断值的组合，即AVGCN≥10，MYCN/CEN2比值≥3，以及MYCN-CEN2差异≥8，能够可靠地区分扩增和非扩增病例。在前瞻性临床样本中，MYCN扩增病例的患病率为4/33（12.1%），表明阳性肿瘤的百分比高于先前报道。我们的数据为视网膜母细胞瘤中基于充分依据的MYCN FISH标准提供了首个证据。