精液介导的耐受性反应中的异质性：定义生殖兼容性的免疫学决定因素

研究问题：模拟性伴侣的特定个体对是否在精液诱导的长期耐受性方面存在差异，以支持妊娠？总结答案：是的，来自双方的因子对精液诱导的长期调节性T细胞（Tregs）的变异性有贡献，其中与接受者相关的因子似乎略微超过与精液供者相关的因子。已知信息：精液含有多种免疫调节因子，可影响接受者的生殖道免疫，促进对精液供者（以下简称“父系”）抗原的耐受性，并最终支持成功妊娠。这些因子包括含有前列腺素和细胞因子的可溶性部分，以及非常高浓度的细胞外囊泡（EVs）。精液的可溶性和囊泡部分均已被证明能促进抗原呈递细胞（APCs）的耐受性表型和迁移，并诱导Tregs。本研究旨在了解模拟性活跃夫妇的个体配对之间耐受性诱导的差异。研究设计、规模、持续时间：我们设计了一项体外配对研究，使用随机精液供者（N=11）和随机自我认定为女性的接受者的外周单个核细胞（PBMCs）（N=3）。精液被分离为富含囊泡的部分（精液细胞外囊泡；SEVs）和可溶性部分（去除囊泡的精浆；VDSP）。每位接受者的单核细胞来源的树突状细胞（MoDCs）暴露于来自每位供者的精液部分，然后与自体初始T细胞共培养，以评估耐受性反应，特别是Tregs（FOXP3+ CD25Hi CD127Lo CD4+ T细胞）的产生及其表型差异（TIGIT+、PD-1+ CTLA-4+或AREG+ Tregs）。然后通过激活诱导标志物（AIM）表达测定筛选这些细胞的T细胞受体依赖性激活。比较了所有精液供者和接受者细胞对的这些反应。此外，筛选了精液部分中的耐受性候选介质，如人类白细胞抗原G（HLA-G）和腺苷生成酶。参与者/材料、设置、方法：本研究使用体外人类细胞培养方法，将初级血液来源的免疫细胞暴露于精液来源的囊泡和非囊泡部分。血液样本来自健康自我认定为女性的供者，精液样本来自健康参与者，他们为一项避孕研究提供了初步筛查标本。通过蛋白质印迹分析表征精液来源的囊泡和非囊泡部分中与免疫耐受相关的标志物。初级免疫细胞暴露于这些精液部分，主要终点包括Treg表型和亚群频率的变化，以及AIM表达。这些结果通过流式细胞术评估。未使用动物模型。主要结果和偶然性的作用：精液（SEV和VDSP）中的HLA-G含量在不同供者间差异显著，从不可检测到高浓度不等。同样，精液从ATP生成腺苷的能力在供者间差异约4倍。来自11名精液供者的SEV和VDSP诱导Tregs的能力高度可变，占CD4+ T细胞群体的2.8%至63.4%。少数供者的精液部分在所有接受者中一致诱导较低的耐受性反应。然而，当考虑两种精液部分的联合效应时，没有一个精液供者未能诱导可测量的耐受性反应。另一方面，一名接受者始终是低反应者。因此，接受者免疫细胞的特征和精液固有特性都是耐受性反应的重要决定因素。精液再暴露增强了Treg AIM表达。当Tregs暴露于VDSP负载的MoDCs时观察到最强效应。相比之下，SEV负载的MoDCs引起的反应较弱。大规模数据：不适用。局限性，注意事项：我们研究的一个局限性是，我们使用了来自随机供者的精液和循环接受者细胞，这些供者未根据任何临床特征（如不孕史）进行选择。此外，我们未将HLA-G含量和腺苷生成酶表达水平与Treg和AIM读数相关联。我们通过Treg激活表明精液诱导对其抗原的耐受性，但我们未证明识别哪些特异性抗原。我们假设在夫妇间观察到的精液诱导耐受性变异在生殖结局中起作用；然而，需要在临床特征明确的队列和使用组织微环境细胞进行更大规模的研究来建立这种联系。研究结果的更广泛意义：我们的发现表明，精液诱导的耐受性高度可变，可能受接受者因素的影响比精液供者因素更大。此外，对先前遇到的精液产生增强激活的Tregs的生成支持了训练免疫和抗原特异性耐受的概念，这些概念在接触伴侣精液后累积产生。这些Tregs准备扩增并支持携带父系同种异体抗原的胎儿妊娠。资金：这项工作由以下资助支持：美国国立卫生研究院/尤尼斯·肯尼迪·施莱弗国家儿童健康与人类发展研究所（R01AI153342）给L.V.，美国国立卫生研究院/国家药物滥用研究所（R01DA040386）给F.H.，美国国立卫生研究院/国家促进转化科学中心（KL2TR002317）给G.G.G.。披露：作者声明无利益冲突。