通过体内Htra2基因编辑预防小鼠获得性感音神经性听力损失

背景：衰老、噪音、感染和耳毒性药物是人类获得性感音神经性听力损失的主要原因，但治疗选择有限。CRISPR/Cas9技术具有巨大潜力，可成为治疗获得性非遗传性感音神经性听力损失的新方法。在此，我们开发了CRISPR/Cas9策略，通过破坏内耳中与细胞凋亡相关但尚未在耳蜗毛细胞保护中进行研究的Htra2基因，来预防氨基糖苷类抗生素诱导的耳聋，这是一种常见的获得性非遗传性感音神经性听力损失。结果：结果表明，腺相关病毒（AAV）介导的CRISPR/SpCas9系统递送可改善新霉素诱导的细胞凋亡，促进毛细胞存活，并显著改善新霉素处理小鼠的听力功能。AAV-CRISPR/Cas9系统的体内保护效果在新霉素暴露后可持续长达8周。为了更有效地递送整个CRISPR/Cas9系统，我们还探索了AAV-CRISPR/SaCas9系统来预防新霉素诱导的耳聋。SaCas9系统的体内编辑效率平均为1.73%。我们观察到，与未注射耳相比，注射耳的听觉脑干反应阈值有显著改善。在新霉素暴露后4周，AAV-CRISPR/SaCas9系统的保护效果仍然明显，在8 kHz频率下听觉脑干反应阈值的改善高达50 dB。结论：这些发现证明了通过Htra2基因编辑安全有效地预防氨基糖苷类抗生素诱导的耳聋，并支持进一步开发CRISPR/Cas9技术用于治疗非遗传性听力损失以及其他非遗传性疾病。