通过体内Htra2基因编辑预防小鼠获得性感觉神经性听力损失

背景：衰老、噪声、感染和耳毒性药物是人类获得性感觉神经性听力损失的主要原因，但治疗选择有限。CRISPR/Cas9技术有望成为获得性非遗传性感觉神经性听力损失的新治疗方式。在此，我们开发了CRISPR/Cas9策略，通过破坏内耳中参与细胞凋亡但尚未在耳蜗毛细胞保护中研究的Htra2基因，来预防氨基糖苷类药物诱导的耳聋，这是一种常见的获得性非遗传性感觉神经性听力损失。结果：结果表明，腺相关病毒（AAV）介导的CRISPR/SpCas9系统递送可改善新霉素诱导的细胞凋亡，促进毛细胞存活，并显著改善新霉素处理小鼠的听力功能。AAV–CRISPR/Cas9系统在体内的保护作用可持续至新霉素暴露后8周。为了更有效地递送整个CRISPR/Cas9系统，我们还探索了AAV–CRISPR/SaCas9系统来预防新霉素诱导的耳聋。SaCas9系统的体内编辑效率平均为1.73%。我们观察到，与未注射的耳朵相比，注射耳朵的听觉脑干反应阈值显著改善。新霉素暴露后4周，AAV–CRISPR/SaCas9系统的保护作用仍然明显，在8 kHz处听觉脑干反应阈值改善高达50 dB。结论：这些发现证明了通过Htra2基因编辑安全有效地预防氨基糖苷类药物诱导的耳聋，并支持CRISPR/Cas9技术在治疗非遗传性听力损失以及其他非遗传性疾病中的进一步开发。