PA-X蛋白N193S突变通过破坏黏膜树突状细胞免疫功能调节2.3.4.4b分支H5亚型病毒的毒力

近年来，H5亚型高致病性禽流感病毒（HPAIVs），特别是2.3.4.4b分支，对家禽、牛和公共卫生构成了全球性威胁。对2000年至2023年H5亚型AIVs的生物信息学分析显示，PA-X N193S突变逐渐增加，并在2.3.4.4b分支的禽类和哺乳动物分离株中成为主导。利用反向遗传学，我们构建了携带PA-X 193N（rWT）和193S（rWT-N193S）的病毒。PA-X N193S突变显著抑制了病毒聚合酶活性，同时增强了宿主关闭功能。在体外和体内，rWT-N193S在禽类和哺乳动物细胞中的复制减弱，对小鼠的致病性降低，并抑制了细胞因子风暴。然而，它增强了树突状细胞（DCs）的摄取，损害了DC的成熟、活化、细胞因子分泌和CD4+ T细胞增殖。在小鼠鼻黏膜实验中，PA-X N193S突变降低了CCL5的表达，改变了DC的募集，并抑制了IL-17/MAPK信号通路。这些发现揭示了一种病毒的权衡策略：该突变减弱了上皮细胞的复制和免疫病理，但增强了DC的摄取并破坏了黏膜免疫功能，这一策略可能促进了PA-X N193S突变在流行性H5亚型病毒中的全球性优势。