二维与悬浮培养下小鼠腔前卵泡的体外发育：α-MEM与SAGE 1-Step培养基的比较

摘要：未成熟卵泡的体外培养在生殖生物学、辅助生殖技术和生育力保存领域仍面临挑战。本研究探讨了α-MEM和SAGE 1-Step培养基在二维（2D）和悬浮培养系统下对小鼠腔前卵泡发育和卵母细胞成熟的影响。从14日龄NMRI小鼠获取腔前卵泡（~130 μm），在两种培养基中分别进行2D或悬浮培养13天。第13天添加hCG诱导减数分裂恢复。我们评估了卵泡生长、卵泡腔形成、卵母细胞成熟、减数分裂纺锤体组织，以及与成熟（Bmp15、Gdf9）、卵丘扩张（Has2、Ptgs2、Lhr、Adamts1）和凋亡（Bax、Bcl2）相关基因的表达。在两种培养系统中，α-MEM组的卵泡腔形成率均较高（P > 0.05）。然而，与α-MEM相比，SAGE 1-Step显著提高了两种系统中的卵母细胞成熟率（2D系统P = 0.01，悬浮系统P = 0.006）。纺锤体染色显示，悬浮培养显著提高了具有正常减数分裂纺锤体组织的卵母细胞百分比（P = 0.002）。基因表达分析显示，悬浮培养中Adamts1显著上调（P = 0.008），Bax显著下调（P = 0.01）。此外，悬浮系统中Bax/Bcl2的凋亡比率显著降低（P = 0.01）。总之，SAGE 1-Step培养基显著促进了卵母细胞成熟，而悬浮系统则能更好地保持减数分裂纺锤体结构并减少细胞凋亡。SAGE 1-Step与悬浮培养的结合为生产高质量卵母细胞提供了优化的微环境。