妊娠诱导的ISG化靶向绵羊蛋白的鉴定及功能推断 I：子宫内膜

反刍动物妊娠的建立依赖于胚胎产生的干扰素-τ，其刺激母体组织中干扰素刺激基因15的产生。干扰素刺激基因15以类泛素方式共价结合并调控细胞内蛋白过程。本研究旨在鉴定子宫内膜中的ISG化蛋白，并推断其特定功能和生化通路。于发情期（第0天）后第17天收集妊娠母羊子宫内膜，并于第10天和第17天收集同步化未授精母羊子宫内膜。此外，用10 ng/ml重组牛干扰素-τ培养牛子宫内膜细胞24小时。使用抗牛干扰素刺激基因15抗体对蛋白提取物中的ISG化蛋白进行免疫沉淀。洗脱液中的ISG化蛋白通过液相色谱-串联质谱进行鉴定，并通过对选定ISG化蛋白进行反向免疫沉淀确认。共鉴定出75种在EC10、EC17和P17母羊子宫内膜中差异表达的ISG化蛋白。Ingenuity通路分析表明，干扰素α/β信号、干扰素刺激基因15抗病毒机制、糖酵解I和糖异生I通路是妊娠子宫内膜中最显著诱导的通路。通过特异性抗体免疫沉淀富集了ISG化蛋白STAT1、MX1和烯醇化酶1，并确认了它们与干扰素刺激基因15的结合。在妊娠绵羊子宫内膜中鉴定出的ISG化蛋白可能在干扰素信号、抗病毒机制和葡萄糖代谢中发挥作用，这些通路对于子宫内膜成功着床和维持妊娠的准备具有重要意义。