Wiskott-Aldrich综合征iPS细胞的基因纠正可挽救前血小板缺陷并改善血小板大小

Wiskott-Aldrich综合征（WAS）是一种严重的X连锁疾病，由WAS基因的功能丧失性突变引起，该基因编码的WAS蛋白（WASP）是除红细胞外所有造血细胞中肌动蛋白细胞骨架的关键调节因子。微血小板减少症是WAS的一个显著特征，也是导致死亡的主要原因，但其潜在机制尚未完全阐明。本研究采用不同的基因编辑策略，纠正了患者来源的WAS诱导多能干细胞（iPSC）系中的突变，生成了同基因的WAS-iPSC系。这些细胞系包括直接突变特异性校正的细胞系，以及整合了由MND或WAS1.6 kb启动子调控的WASP转基因盒并靶向安全港位点AAV1的细胞系。我们的结果表明，直接突变校正成功地将iPSC来源的巨核细胞（MKs）中的WASP水平恢复到相当于野生型的水平。相比之下，使用MND和WAS1.6启动子的AAV1靶向策略产生的WASP水平较低。值得注意的是，只有突变特异性校正的细胞系显示出前血小板结构的改善，并产生了更大尺寸的血小板。我们的研究结果强调了WASP在人类血小板生成过程中的关键作用，并表明诸如直接基因校正等能够在MKs中实现WASP生理水平的治疗方法，有望改善WAS患者的血小板缺陷。