多重定点诱变降低非洲猪瘟病毒E2泛素结合蛋白（ASFV-pI215L）的酶活性和抗体识别能力

非洲猪瘟病毒（ASFV）引起家猪和欧亚野猪的传染性致命疾病，对全球养猪业构成严重威胁，目前尚无抗病毒药物，且疫苗使用仅限于越南。值得注意的是，ASFV编码一种E2泛素结合酶（ASFV-pI215L），该酶对病毒复制和逃避I型干扰素免疫应答至关重要，提示其功能受损可能导致减毒活疫苗的产生。本研究显示，ASFV-pI215L在222个ASFV分离株（包括新出现的毒株）中高度保守，强调了其作为疫苗设计靶点的价值。此外，我们的诱变研究表明，包含R11-E15和D130-S134残基的单点和多点氨基酸取代降低了ASFV-pI215L的E2泛素结合活性。同时，在P61和F69残基之间定位并突变了一个强免疫显性B细胞表位，降低或消除了IgG和IgM的识别以及ASFV-pI215L的E2活性。总之，本研究强调合理的靶向诱变可以降低ASFV-pI215L的E2泛素结合活性和免疫识别，为开发能够区分感染动物与免疫动物的减毒疫苗提供了策略。