通过原位测序在小鼠和猕猴中进行基因编辑的空间图谱分析

碱基编辑和先导编辑技术能够在分裂和非分裂细胞中精确安装特定的核苷酸编辑，为直接在生物体内纠正致病突变提供了潜力。然而，要充分挖掘其治疗潜力，以高空间分辨率准确测量编辑效率至关重要。本研究使用基于成像的原位测序技术，在原生组织中绘制碱基编辑和先导编辑事件的空间分布图。我们首先在使用内含肽分裂腺嘌呤碱基编辑器或通过腺相关病毒载体递送先导编辑器处理的小鼠大脑中建立并验证了该技术。随后，我们将ISS应用于使用脂质纳米颗粒包裹的mRNA和向导RNA编码的腺嘌呤碱基编辑器处理的小鼠和猕猴肝脏中。在所有肝小叶代谢区均观察到了有效的编辑。此外，在重复给药RNA-LNP的实验中，初次剂量不影响后续剂量的编辑效率和分布。我们的结果表明，ISS可以可视化体内基因编辑事件，并提示使用RNA-LNP递送碱基编辑器可用于治疗多种代谢性肝病。