不宁腿综合征患者脑脊液通过破坏转铁蛋白受体调控减少血脑屏障内皮细胞铁摄取

目的：不宁腿综合征（RLS）是一种以不可控的移动腿部冲动为特征的感觉运动障碍。RLS的病理生理学标志是脑铁缺乏。血脑屏障（BBB）的内皮细胞（ECs）负责调节脑铁摄取。我们的目标是确定RLS患者内皮细胞的脑铁摄取是否发生改变。方法：从诱导多能干细胞（iPSCs）生成人内皮细胞。将内皮细胞暴露于RLS（n = 14）或对照脑脊液（CSF）（n = 15），并测定57Fe-转铁蛋白的转运。使用免疫印迹和定量聚合酶链反应分析蛋白质、微RNA（miRNA）和信使RNA（mRNA）的表达。我们使用pMIR-REPORTER荧光素酶载体在HEK-293细胞中进行了miRNA与转铁蛋白受体1（TfR1）3'铁反应元件（IRE）的相互作用研究。结果：与对照组相比，RLS受试者CSF中的游离铁和蛋白结合铁均减少。与对照相比，内皮细胞暴露于RLS CSF显著降低了57Fe的摄取和转运。暴露于RLS-CSF的内皮细胞中TfR1表达降低，而铁调节蛋白（IRP）增加。TfR1的表达也受miRNA调节。RLS CSF来源的细胞外囊泡中miR-124-3p水平高于对照组。它与pMIR-REPORTER载体中的TfR1 3' IRE序列结合，降低了荧光素酶的表达。解读：当内皮细胞用RLS患者的CSF处理时，它们表现出铁缺乏的特征，但TfR1表达并未如预期那样增加。TfR1蛋白表达的降低是由于增加的miR-124-3p结合导致TfR1 mRNA稳定性下降所致。