RNA结合蛋白ILF2通过调控NPM1/NF-κB轴促进糖尿病足溃疡伤口愈合的机制研究

背景：糖尿病足溃疡（DFU）是一种严重的糖尿病并发症，以愈合受损为特征，常涉及成纤维细胞衰老及衰老相关分泌表型（SASP）。RNA结合蛋白（RBPs）在此过程中的作用尚不明确。本研究探讨了RBP白细胞介素增强子结合因子2（ILF2）在DFU发病机制中的功能和机制。方法：通过对公共单细胞和批量转录组数据集进行生物信息学分析，鉴定差异表达的RBPs。随后在临床DFU样本和糖尿病小鼠模型中验证了ILF2的下调。在高糖处理的成纤维细胞中进行功能实验，评估增殖、迁移和SASP。机制上，通过RNA测序、RNA结合蛋白免疫沉淀和RNA下拉实验鉴定下游靶点，同时通过免疫共沉淀和拯救实验验证NPM1/NF-κB轴。最后，使用糖尿病小鼠模型研究ILF2过表达/敲低以及NPM1敲低对伤口愈合的影响。结果：生物信息学分析发现ILF2在DFU中显著下调。这一发现在DFU患者组织、糖尿病小鼠伤口和高糖处理的成纤维细胞中得到一致验证。功能上，ILF2过表达促进成纤维细胞增殖和迁移，同时抑制SASP，而敲低则加剧衰老。机制上，ILF2直接结合核磷蛋白（NPM1）mRNA促进其降解。ILF2缺失导致NPM1异常积累，增强NPM1-磷酸化p65相互作用并激活NF-κB通路。拯救实验证实NPM1敲低可逆转ILF2缺失诱导的细胞功能障碍。关键的是，这些发现在从DFU患者分离的原代成纤维细胞中得到验证。在体内，ILF2过表达加速伤口愈合，而敲低则延缓该过程。此外，NPM1敲低有效改善了受损的愈合表型并降低了SASP水平。结论：本研究阐明了一个新的ILF2-NPM1-NF-κB调控轴。ILF2通过去稳定NPM1 mRNA，成为炎症衰老的关键抑制因子，突显了其作为DFU治疗靶点的潜力。