RNA结合蛋白ILF2通过调控核磷蛋白1/NF-κB轴促进糖尿病足溃疡创面愈合的机制

背景：糖尿病足溃疡（DFU）是一种严重的糖尿病并发症，其特征是愈合受损，通常涉及成纤维细胞衰老和衰老相关分泌表型（SASP）。RNA结合蛋白（RBPs）在此过程中的作用尚不清楚。本研究旨在探讨RBP白细胞介素增强子结合因子2（ILF2）在DFU发病机制中的功能和作用机制。方法：通过对公共单细胞和批量转录组数据集的生物信息学分析，鉴定差异表达的RBPs。随后在临床DFU样本和糖尿病小鼠模型中验证了ILF2的下调。在高糖（HG）处理的成纤维细胞中进行功能实验，评估增殖、迁移和SASP。机制上，通过RNA测序、RNA结合蛋白免疫沉淀和RNA pull-down实验鉴定了下游靶标，而co-IP和救援实验验证了NPM1/NF-κB轴。最后，使用糖尿病小鼠模型研究ILF2过表达/敲低和NPM1敲低对创面愈合的影响。结果：生物信息学分析确定ILF2在DFU中显著下调。这种减少在DFU患者组织、糖尿病小鼠创面和HG处理的成纤维细胞中得到一致验证。功能上，ILF2过表达促进成纤维细胞增殖和迁移，同时抑制SASP，而敲低则加剧衰老。机制上，ILF2直接结合核磷蛋白（NPM1）mRNA以促进其降解。ILF2缺乏导致NPM1异常积累，增强NPM1-磷酸化p65相互作用和NF-κB通路激活。救援实验证实NPM1敲低逆转了ILF2缺乏诱导的细胞功能障碍。至关重要的是，这些发现在从DFU患者分离的原代成纤维细胞中得到验证。在体内，ILF2过表达加速创面愈合，而敲低则延迟该过程。此外，NPM1敲低有效改善了愈合受损的表型并降低了SASP水平。结论：本研究阐明了一个新的ILF2–NPM1–NF-κB调控轴。ILF2通过不稳定NPM1 mRNA作为炎症性衰老的关键抑制因子，突出了其作为DFU治疗靶点的潜力。