GLP1-E2疗法联合低剂量抗CD3治疗延缓晚期糖尿病前期NOD小鼠的自身免疫性糖尿病并增强疾病保护

目的/假设：抗CD3单克隆抗体通过调节自身免疫活性，可延缓高风险个体进展至3期1型糖尿病。然而，其反应具有可变性和短暂性，且治疗仅提供间接的β细胞保护。本研究探讨了靶向β细胞、增强其存活和功能的融合化合物胰高血糖素样肽-1-17ß-雌二醇偶联物是否能在NOD小鼠中增强短期低剂量抗CD3疗程，以预防自身免疫性糖尿病。我们假设同时靶向免疫失调和β细胞脆弱性可提供互补且可能协同的益处，从而产生比任一单药治疗更持久的保护作用。方法：将雌性晚期糖尿病前期NOD小鼠随机分为四组：未处理对照组、抗CD3单药治疗组、GLP1-E2单药治疗组和联合治疗组。抗CD3以2.5 µg/天的剂量静脉给药，连续5天；GLP1-E2以100 nmol kg−1 day−1的剂量皮下给药，持续18周。纵向监测小鼠的糖尿病发病情况。通过空间转录组学和免疫染色分析胰腺，以评估免疫浸润、β细胞完整性和分子通路改变。结果：在30周龄时，未处理对照组的糖尿病发病率为77%，抗CD3单药治疗组为66%，GLP1-E2单药治疗组为61%。联合治疗显著将糖尿病发病率降低至38%，并将疾病发作延迟6周，且治疗停止后保护作用持续5周。GLP1-E2单药治疗将胰岛免疫细胞浸润减少到与抗CD3单药和联合治疗相似的程度，但不影响外周淋巴细胞计数。空间转录组学显示，在疾病进展过程中，与β细胞应激、去分化、'禁用'基因、抗原呈递和炎症相关的基因反应增加。这些过程在单药和联合治疗中均得到缓解，其中抗CD3主要恢复β细胞特性，而GLP1-E2则降低β细胞应激和免疫原性。在17周龄治疗小鼠中，CD81和TUNEL染色水平与12周龄血糖正常的NOD小鼠相当，而在17周龄未处理小鼠中则升高。这种减少的β细胞去分化和死亡与改善的β细胞保护以及相对于新发糖尿病小鼠在26.5周时更好的β细胞质量保存相关。结论/解释：低剂量抗CD3或GLP1-E2单药治疗延缓了雌性NOD小鼠的糖尿病发作并保留了β细胞质量，而联合治疗提供了显著更优的保护作用。同时靶向免疫失调和β细胞脆弱性，突显了联合疗法在增强和延长1型糖尿病免疫治疗效果方面的潜力。